鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

實時熒光定量PCR：
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限，實現了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據標準曲線獲得定量結果。因此，實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的：
1）Ct值的重現性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數時，剛剛進入真正的指數擴增期（對數期），此時微小誤差尚未放大，因此Ct值的重現性*，即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系，可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定，因此，實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確，重現性的定量方法，已得到*的*，廣泛用于基因表達研究、轉基因研究，藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。
熒光化學物質：
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產生熒光。PCR產物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 。

熒光定量PCR服務：
公司推出，該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。
（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設計與合成。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。
（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。
（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準：
 我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。

腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒C型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Adenovirus(AV)
嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas hydrophila
斑點氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas punctata
滅鮭氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas salmonicida
溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas sobria
氣單胞菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Aeromonas spp.
蜂房小甲蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Aethina tumida
阿菲波菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Afipia spp.
非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 African Swine Fever Virus(ASFV)
放線共生放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Aggregatibacter actinomycetemcomitans
莢膜阿耶羅菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Ajellomyces capsulate
類天花病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 Alastrim Virus
糞產堿桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Alcaligenes faecalis
1(RT-1狷羚皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-11
阿留申病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 Aleutian Disease Virus(ADV)
交鏈孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Alternaria spp.
鵝裂口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Amidostomum anseri
擬無枝菌酸菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Amycolaptosis spp.
自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Amycolata autotrophica
中央無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 Anaplasma centrale
邊緣無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 Anaplasma marginale
嗜吞噬細胞無漿體(無形體)探針法熒光定量PCR試劑盒 Anaplasma phagocytophilum
無漿體(無形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Anaplasma spp.
十二指腸鉤口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 Ancylostoma duodenale

Mouse receptor activator of nuclear factor kappaB ligand ELISA Kit 96T/48T 小鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)
Mouse TpP ELISA Kit 96T/48T 小鼠血栓前體蛋白（TpP）
Mouse GnRH ELISA Kit 96T/48T
Mouse inhibin B ELISA Kit 96T/48T 小鼠抑制素B（INH B0
Mouse thyrotropin-releasing hormone ELISA KIT 96T/48T 小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)
Mouse CRH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)
Mouse Insulin Receptor β（ISR-β）ELISA KIT 96T/48T 小鼠胰島素受體β（ISR-β）
Mouse HbA1c ELISA Kit 96T/48T 小鼠糖化血紅蛋白（HbA1c）
Mouse lymphocyte function associated antigen-3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠LFA-3(CD58)
Mouse HLA-2 ELISA Kit 96T/48T 小鼠組織相容性抗原（HLA-2）
Mouse HLA-1 ELISA Kit 96T/48T 小鼠組織相容性抗原（HLA-1）
Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit 96T/48T 小鼠骨成型蛋白質7（BMP-7）
Mouse HA ELISA Kit 96T/48T 小鼠透明質酸(HA)
Mouse 25(OH)D3 ELISA Kit 96T/48T 
Mouse Myoglobin ELISA Kit 96T/48T 小鼠肌紅蛋白(MYO)
Mouse Thromboxane B2 ELISA Kit 96T/48T 小鼠血栓素（TXB2）
Mouse acetylcholine ELISA Kit 96T/48T 
Mouse Tissue Polypeptide Antigen ELISA Kit 96T/48T 小鼠組織多肽抗原（TPA）
鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒Mouse t-PA ELISA Kit 96T/48T 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)
Mouse β-Thromboglobulin ELISA Kit 96T/48T 小鼠β血小板球蛋白(β-TG)
Mouse dihy－drotestosterone ELISA Kit 96T/48T 小鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
Mouse SPE(IgG,M) ELISA Kit 96T/48T 小鼠抗抗體(SPE)
Mouse Epinephrine ELISA Kit 96T/48T 小鼠腎上腺素(Epinephrine)
Mouse Noradrenalin ELISA Kit 96T/48T 
Mouse PGE1 Elisa kit 96T/48T 小鼠前列腺素E1(PGE1)

幾種傳統(tǒng)熒光定量PCR方法簡介：
1）內參照法：
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物，內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記，下游引物不標記。在模板擴增的同時，內標也被擴增。在PCR產物中，由于內標與靶模板的長度不同，二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來，分別測定其熒光強度，以內標為對照定量待檢測模板。
2）競爭法：
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中，待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增（其中一個引物為熒光標記）。擴增后用內切酶消化PCR產物，競爭性模板的產物被酶解為兩個片段，而待測模板不被酶切，可通過電泳或高效液相將兩種產物分開，分別測定熒光強度，根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
3）PCR－ELISA法：
利用或等標記引物，擴增產物被固相板上特異的探針所結合，再加入抗或酶標抗體－辣根過氧化物酶結合物，終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實驗，若加入內標，作出標準曲線，也可實現定量檢測目的。