兔基質金屬蛋白酶-3elisa檢測試劑盒品牌Rabbit MMP-3 ELISA Kit 產(chǎn)品名稱 | 兔基質金屬蛋白酶-3elisa檢測試劑盒品牌 | 英文名稱 | Rabbit MMP-3 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
兔基質金屬蛋白酶-3elisa檢測試劑盒品牌Rabbit MMP-3 ELISA Kit【實驗用途】MMP-3,基質金屬蛋白酶-3,為MMPs家族,是依賴鋅和鈣的內(nèi)肽酶,能夠降解細胞外基質的所有成分。它們在許多生理過程中發(fā)揮重要作用,如胚胎發(fā)育、組織成型、復制、再生等。它們參與很多病理過程如關節(jié)炎、癌癥、心血管疾病。新合成MMPs的量主要由復制水平控制。MMPs的活性主要由酶原的活化和其抑制蛋白質TIMPs所調(diào)節(jié)。MMP-3可降解一系列基質如Ⅳ,Ⅴ,Ⅶ,Ⅹ型膠原,彈性蛋白和纖維連接蛋白。。 試劑配制: 1、兔基質金屬蛋白酶-3elisa檢測試劑盒品牌酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。 2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 樣本處理及要求: 1.兔基質金屬蛋白酶-3elisa檢測試劑盒品牌血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。 仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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