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PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒

PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒
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產(chǎn)品特點:
PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
  PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒的詳細(xì)資料:

PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 

產(chǎn)品名稱

PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒

英文名稱

 

貨號

EYX99654

 

 

 

實驗要點及說明;

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存;

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

操作要點;

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA檢測試劑盒MouseCyclosporineA,CsAELISAKit 96T/48T  139051-27-7知母皂苷B品牌  Anemarsaponin B

人鹽抵抗的酸性1酸酶(AP)試劑盒 Human Tarate Resista Acid Phosphatase,AP ELISA Kit  136656-07-0知母皂苷BII規(guī)格  Timosaponin B-

Ratamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  136565-73-6知母皂苷E  Anemarsaponin E

載玻片細(xì)胞細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  24512-63-8梔子苷說明書  Geniposide

MouseActivinA,ACV-AELISA試劑盒小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  83-86-3植酸品牌   Phytic acid
2292-16-2甲基蓮心堿說明書  Neferine   英文名稱RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)規(guī)格:96T/48T

22910-60-7銀杏酸(C151)品牌  Ginkgolic Acid (C15:1)  英文名稱RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)規(guī)格:96T/48T

22888-70-6水飛薊賓規(guī)格  Silymarin  英文名稱RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)規(guī)格:96T/48T

22681-72-7丹參素說明書  Danshensu   英文名稱RatPTHELISAKit大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

225937-10-0(+)兒茶素  (+)-Catechin hydrate   英文名稱RatPTHELISAKit大鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
小鼠脂聯(lián)素(human adiponectin)ELISA試劑盒 ,英文名: human adiponectin ELISA Kit  2034-69-7西瑞香素規(guī)格  Daphnoretin

牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T  177931-17-8三白草酮  Sauchinone

AP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)試劑盒 human PP1030 ELISA Kit  71610-00-9三尖杉寧堿說明書  Cephalomannine

英文名稱MouseIL-2sRαELISAkit小鼠白介素2可溶性受體α鏈(CD25)(IL-2sRα)規(guī)格:96T/48T  5302-45-4三七素品牌  dencichine

冰凍切片總膽高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒50  三七皂苷Fc規(guī)格  Notoginsenoside Fc
PrimaCell™大鼠膀胱上皮細(xì)胞試劑盒61825-98-7西貝母堿品牌  Sipeimine  轉(zhuǎn)基因棉花MON531品系試劑盒20

6155-35-7鼠李糖說明書  L-Rhamnose monohydrate  轉(zhuǎn)基因棉花MON15985品系試劑盒20

61371-55-9格列風(fēng)內(nèi)酯說明書  Griffonilide   轉(zhuǎn)基因棉花MON1445品系試劑盒20

61303-13-7異類葉升麻苷品牌  Isoacteoside  轉(zhuǎn)基因棉花GK19品系試劑盒20

61301-33-5五味子丙素品牌  schisandrin C  轉(zhuǎn)基因大豆GTS40.3.2品系試劑盒20

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 大鼠膀胱上皮 細(xì)胞試劑盒
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