人呼吸道組織提取物說明書

人呼吸道組織提取物【Airway: Normal Human Airway Derivatives】

呼吸道并不僅僅是氣體的通道，能對進入的氣體進行處理，達到肺部氣體的溫暖、濕潤、清潔。公司科技提供來自新鮮或冷凍人呼吸道組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

λDNA /HindⅢ Marker2ul（次）Trehalose9海藻糖

2ul×（0次）Chlorogenic acid3277綠原酸

DNA MarkerⅠ（for PAGE）2ul×4支Ethyl rutinoside1875397蕓香糖乙苷

2ul×支18-Hydroxytritriacontan6-one971912

bp Ladder（for PAGE）2ml×4支Mannitol695甘露醇
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  947529-92-2  中文名：  分子式：C20H36O3  度：97.0%  關鍵詞：    小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit              

Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  60263-06-1  中文名：  分子式：C10H12O4  度：%  關鍵詞：  千里光屬; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠神經營養因子3(-3)ELISAKit  

Ethopabate  1959/6/3  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：99.0%      小鼠神經營養因子4(-4)ELISAKit  

Estrone  53-16-7  中文名：雌酮  分子式：C18H22O2  度：99.0%  關鍵詞：    小鼠骨保護素(OPG)ELISAKit  

Estradiol-3-benzoate-17-butyrate  63042-18-2  中文名：雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯  分子式：C29H34O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠B因子(BF)ELISAKit
沙苑子苷A HPLC≥98% 20mg Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNPELISA試劑盒人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鯊肌醇 HPLC≥98% 20mg Human3-Niotyrosine,3-ELISA試劑盒人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA試劑盒規格：96T/48T

山茶甙A HPLC≥98% 20mg Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

山茶甙B HPLC≥98% 20mg Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISA試劑盒人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

山豆根色滿二氫黃酮Ⅰ HPLC≥98% 20mg Human5-Hydroxyyptamine,5HTELISA試劑盒人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒規格：96T/48T

山柑子堿 HPLC≥98% 20mg Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISA試劑盒人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒規格：96T/48T

山梗菜堿 HPLC≥97% 20mg Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 人8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

山姜素 HPLC≥98% 20mg HumanAcidPhosphatase,ACPELISAKit 人酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

山椒子烯醇 HPLC≥98% 10mg HumanAcidPhosphatase,ACPELISA試劑盒人酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

山椒子烯酮 HPLC≥98% 10mg Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 人酸性神經鞘0脂酶(ASM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
人呼吸道組織提取物說明書兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19 

兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2  度：98.0%

兔骨保護素elisa試劑盒   兔骨保護素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔骨保護素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔骨保護素試劑盒、兔骨保護素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4 

兔骨保護素<破骨細胞抑制因子>   英文名稱：   Rabbit Osteoprotegerin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   OPG  4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名：  分子式： 

兔骨保護素(OPG)ELISAKIT     4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4