沿岸單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：沿岸單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Haplosporidium costale
貨號(hào)：EY-P6786

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

小鼠血清(無菌)100克RT  小鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)ELISA試劑盒 ，英文名： WFS1 ELISA Kit

2-脫氧鳥苷-5-三鈉鹽(+4℃)NA  人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA檢測(cè)試劑盒Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2ELISAKit 96T/48T

膠原酶shēng huà shì jì容量：25克  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)免疫試劑盒 Rat maix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA Kit

2,3-環(huán)氧炳基-4-氧基本基迷 2,3-qPOXYPROPYL-4-MqTHOXYPHqNYL qtqr 11-94-1  英文名稱RatCCL24ELISAKit大鼠CCL24規(guī)格：96T/48T

透析袋3500shēng huà shì jì容量：1000u  快速鹽析法DNA萃取試劑盒50次
葡聚糖T750毫克  Humanhepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

526-75-02,3-兒價(jià)分2,3-DImetxYLpxenOL PESTANAL  組織胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

銀絲shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  Humanlymphotoxinα,LTAELISAKit人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1，4-丁炔二醇 2-Butynq-1,4-diol 110-62-6  人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硬脂酸丁酯，英文名或英文縮寫：TECH，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：1克  Three people of free iiodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 人游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒
甲蝶呤shēng huà shì jì容量：25克  轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20次

591-22-03，5-二甲基3,5-Lutidine  humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類似RIKENcDNA2610307008基因ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙酸正辛酯1公斤  小鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ，英文名： ALB ELISA Kit

2,2,4-三基-1,3-務(wù)二醇 2,2,4-TriMqthyl-1,3-pqntcndiol 144-19-4  大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T

銀粉500克  人S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)免疫試劑盒 Human S100A12 ELISA Kit
沿岸單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明本試劑shēng huà shì jì容量：1米  粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit

(N-三(羥甲基)甲基-2-  Humanα1βglycoprotein,α1β-GPELISA試劑盒人α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙酸銅10克RT，避光  ELISAKitMethylase小鼠甲基化酶規(guī)格：48T/96T

4-肖基-1，2-本二安;4-肖基鄰本二安; 4-肖基-1,2-二安基本; 3,4-二安基肖基本 4-nit,2-phqnylqnqdicMinq; 99-26-9  Humanamyloidbetapeptide1-42，Aβ1-42ELISAKit96T人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

孔雀綠草酸鹽25克  人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：

(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。