大鼠關節(jié)軟骨組織提取物培養(yǎng)

大鼠關節(jié)軟骨組織提取物 【Rat Bone: Normal Articular Cartilage Derivatives】

軟骨主要功能：（1）軟骨是人身體中不會發(fā)生癌變的組織。（2）骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構成的。（3）軟骨一般起到承重負荷，減少關節(jié)間骨骼摩擦等作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠關節(jié)軟骨組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法；
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項；

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項；

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

Basic Fuchsin 堿性品紅/堿性復紅   5g21-Deoxyneridienone B92493

BCA 二甲酸二鈉鹽  -Hydroxyecdysone52894-羥基蛻皮甾酮

BCIP 5-溴-氯-吲哚基磷酸酯對甲苯胺鹽   0mg2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate19693

BES   g/25g2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid9128

Betaine 甜菜堿   g/25g 2-[(6-Chloro,4-dihydro-methyl,4-dioxo(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile8657586
Cleroindicin F  中文名：  分子式：C8H10O3  度：97.0%  促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒  

1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C12H7ClOS  度：%  促黃體激素(LH)ELISA試劑盒  

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%  雌二醇(E2)ELISA試劑盒  

Ethyl β-D-fructofuranoside  中文名：乙基-β-D-果糖苷  分子式：C8H16O6  度：97.0%  腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒           

Methyl β-D-fructofuranoside  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6  度：%  促甲狀腺素(TSH)ELISAKit
滅菌丹標準溶液(10μg/ml,u=6%)  N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% 人β4整合素(ITG β4/CD104)試劑盒 Human ITG β4/CD104 ELISA Kit

惡草酮(分析標準品,97.5%)  Oxadiazon  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,97.5% 人β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)試劑盒 Human β-hexosaminidase A,β-Hex A ELISA Kit

甲基嘧啶磷(10μg/ml,u=3%)  Pirimiphos-methyl solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=3% 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA檢測試劑盒Humanβ-hexosaminidaseAELISAKit 96T/48T

撲滅津(標準品)  Propazine  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA檢測試劑盒Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 96T/48T

戊炔草胺(標準品)  Propyzamide  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 Human β-galactosidase,βGAL ELISA Kit

腐霉利(標準品)  Procymidon  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 人β-促脂素(β-LPH)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 96T/48T

吡蚜酮(標準品)  Pymetrozin  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit

敵稗(分析標準品,98%)  Propanil  質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98% 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T

抑霉唑標準溶液(10μg/ml,u=2%)  Imazalil solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 人β淀粉樣蛋白25-35(Aβ25-35)試劑盒 Human amyloid beta peptide 25-35,Aβ25-35 ELISA Kit

稻瘟靈標準溶液(10μg/ml,u=2%)  Isoprothiolane solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 人β淀粉樣多肽42(Aβ 42)試劑盒 Human Amyloid beta 42,Aβ 42 ELISA kit
大鼠關節(jié)軟骨組織提取物培養(yǎng)豚鼠促卵泡素elisa試劑盒   豚鼠促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Ambrisentan  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%

豚鼠促卵泡素(FSH)ELISAKit                 Ambroxol hydrochloride  中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O 

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒     Ambrisentan  177036-94-1  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%  關鍵詞： 

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit     Altrenogest  850-52-2  中文名：烯丙孕素  分子式：C21H26O2  度：98.0%  關鍵詞： 

豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Triethyl   中文名：檸檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7