我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) | 小鼠腦膜成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū) | Mouse Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts | EYX98895 |
小鼠腦膜成纖維細(xì)胞【Mouse Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts】 產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基; ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。 2、細(xì)胞復(fù)蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化; ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
實(shí)驗(yàn)事項(xiàng): 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。 實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。 6. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。 7. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。 胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂100克 ELISAKitxR小鼠硫氧還蛋白還原酶規(guī)格:48T/96T TTC 5g/10g/25g/100g原裝 Amresco 0765 HumanAi-myocardialaibody,AMAELISAKit人抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 寡霉素shēng huà shì jì容量:1公斤 人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 4-酰基本氧基醋 4-Formylphqnoxyccqtic ccid 04-71-3 小鼠牛小腸堿性酶(CIAP)免疫試劑盒 Mouse Calf iestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISA Kit 改良Y培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT10克 周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒 ,英文名: CDK-2 ELISA Kit 替卡西林鈉shēng huà shì jì容量:25克 Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 1201-38-32,5-二甲氧基本以酮2',5'-Dimetxoxyacetopxenone HumanCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA試劑盒人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 2-基異25克 組氨酸(leucine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次 2-溴-6-肖基本 2-Bromo-6-nitnotoluqnq 2289-32-2 humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Fmoc-L-羥脯酸25克 小鼠α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)ELISA試劑盒 ,英文名: α2PI ELISA Kit 強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT25克 HumanAngiotensinⅡReceptor2aibody,AT2R-AbELISA試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 998-94-3鄰基本(易-1)entxnenili ei7 HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit人心肽(ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:25克 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-溴-4-苯 2-Bromo-4-chloroanisole,98% 60633-25-2 5G 通用試劑 兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒 Rabbit monocyte chemotactic protein 1,MCP-1 ELISA kit 二本安言醋鹽 DiphqnylcMinq xy7nochloridq 237-67-7 乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒 ,英文名: LF/LTF Ab-Ig ELISA Kit 小鼠腦膜成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)嶙酸氫二鉀shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (溴代十六烷基胺) Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 間硝基本胺100u HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 啊利新藍(lán)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1 HumanChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA試劑盒人絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T γ-環(huán)糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3 總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次 注意事項(xiàng): 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的)。 3.嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 |