人胰島素抗體elisa檢測試劑盒品牌Human Anti-Ins ELISA Kit 產品名稱 | 人胰島素抗體elisa檢測試劑盒品牌 | 英文名稱 | Human Anti-Ins ELISA Kit | 規格 | 48T/96T |
人胰島素抗體elisa檢測試劑盒品牌Human Anti-Ins ELISA Kit【實驗用途】1983年Banting發現用胰島素治療的糖尿病人血清中存在抗胰島素物質,后證明這種物質是γ球蛋白,命名為胰島素抗體。胰島素抗體的產生與胰島素制劑的免疫原性有關,胰島素抗體大量生成可導致病人對胰島素不敏感。 胰島素抗體主要是IgG,少數受藥者可查到IgM、IgD、IgE胰島素抗體,IgE抗體主要出現在對胰島素產生過敏反應的病人。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。。 試劑配制: 1、人胰島素抗體elisa檢測試劑盒品牌酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。 2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 樣本處理及要求: 1.人胰島素抗體elisa檢測試劑盒品牌血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。 仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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