人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物 【Human Brain : Normal Nerve Small Glial Cell Derivatives】 人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物是從人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取的,人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞從正常人小腦組織制備。正常人小腦組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱(chēng) | 人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物 | 英文名稱(chēng) | Human Brain : Normal Nerve Small Glial Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99083 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀(guān)察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 生化分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)次 生化分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)次Ondansetron996142昂丹司瓊 南美胎牛血清0mlOndansetron hydrochloride996141鹽酸昂丹司瓊 Rhodamine Phalloidin0ulBupivacaine hydrochloride10鹽酸布比卡因 Green Fluorescent Protein (GFP) Antibody5mgAmbroxol hydrochloride238282鹽酸氨溴索 MyHC (MF) 上清液1mlBenazepril hydrochloride865414鹽酸貝那普利 N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine 中文名: 分子式:C10H11N3 豬α干擾素elisa試劑盒 豬α干擾素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬α干擾素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬α干擾素試劑盒、豬α干擾素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine 中文名:N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒 分子式:C14H22N4O4 豬白介素10elisa試劑盒 豬白介素10試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬白介素10試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白介素10試劑盒、豬白介素10eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide 中文名:N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺 分子式:C6H12N2O4 豬B細(xì)胞瘤因子2elisa試劑盒 豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒、豬B細(xì)胞瘤因子2eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide 中文名:N,N-雙(2-氯乙基)對(duì)甲苯磺酰胺 分子式:C11H15Cl2NO2S 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白elisa試劑盒 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒、豬Bcl-2相關(guān)X蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide 中文名: 分子式:C22H16N6O2S 豬α葡萄糖苷酶(α-Glu)ELISA試劑盒 依匹斯汀 Epinastine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatFSHELISAKit大鼠促卵泡生長(zhǎng)激素(RatFSH)規(guī)格:96T/48T 9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽 9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatFSHELISAKit大鼠促卵泡生長(zhǎng)激素(RatFSH)規(guī)格:96T/48T 7-氯依匹斯汀鹽酸鹽 7-Chloro Epinastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatFSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格:96T/48T 9-氧絡(luò)依匹斯汀鹽酸鹽 9-Oxo Epinastine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatFSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格:96T/48T 6β-羥基依普利酮 6β-Hydroxy Eplerenone 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatFXELISAKit大鼠凝血因子X(FX)規(guī)格:96T/48T 依普利酮醇酸鉀鹽 Eplerenone Hydroxyacid Potassium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)Ratf-β-HCGELISAKIT大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-β-HCG)規(guī)格:96T/48T 4-氧*度酸 4-Oxo Etodolac 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格:96T/48T N-甲基*度酸 N-Methyl Etodolac 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格:96T/48T 依維莫司-d4 Everolimus-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格:96T/48T D 13223-d4 (氟吡汀代謝產(chǎn)物) D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格:96T/48T 人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物 Uzarigenin 466-09-1 中文名: 分子式:C23H34O4 Humanenkephalin,ENKELISA試劑盒人腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Odoroside H 18810-25-8 中文名: 分子式:C30H46O8 組織PKCζ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次 Neridienone B 61671-56-5 中文名: 分子式:C21H28O4 HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Neritaloside 465-13-4 中文名: 分子式:C32H48O10 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ophiopogonin D 945619-74-9 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16 Human thymus activation regulated chemokine (TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒 |