人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物 【Human Brain : Normal Nerve Small Glial Cell Derivatives】

人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物是從人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取的，人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞從正常人小腦組織制備。正常人小腦組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

生化分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)次

生化分析檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)次Ondansetron996142昂丹司瓊

南美胎牛血清0mlOndansetron hydrochloride996141鹽酸昂丹司瓊

Rhodamine Phalloidin0ulBupivacaine hydrochloride10鹽酸布比卡因

Green Fluorescent Protein (GFP) Antibody5mgAmbroxol hydrochloride238282鹽酸氨溴索

MyHC (MF) 上清液1mlBenazepril hydrochloride865414鹽酸貝那普利
N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine  中文名：  分子式：C10H11N3    豬α干擾素elisa試劑盒   豬α干擾素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬α干擾素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬α干擾素試劑盒、豬α干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine  中文名：N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒  分子式：C14H22N4O4    豬白介素10elisa試劑盒   豬白介素10試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬白介素10試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬白介素10試劑盒、豬白介素10eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4    豬B細(xì)胞瘤因子2elisa試劑盒   豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒、豬B細(xì)胞瘤因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide  中文名：N,N-雙(2-氯乙基)對(duì)甲苯磺酰胺  分子式：C11H15Cl2NO2S    豬Bcl-2相關(guān)X蛋白elisa試劑盒   豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬Bcl-2相關(guān)X蛋白試劑盒、豬Bcl-2相關(guān)X蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide  中文名：  分子式：C22H16N6O2S    豬α葡萄糖苷酶（α-Glu）ELISA試劑盒
依匹斯汀  Epinastine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatFSHELISAKit大鼠促卵泡生長(zhǎng)激素(RatFSH)規(guī)格：96T/48T

9,13b-脫氫依匹斯汀鹽酸鹽  9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatFSHELISAKit大鼠促卵泡生長(zhǎng)激素(RatFSH)規(guī)格：96T/48T

7-氯依匹斯汀鹽酸鹽  7-Chloro Epinastine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatFSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格：96T/48T

9-氧絡(luò)依匹斯汀鹽酸鹽  9-Oxo Epinastine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatFSHELISAKit大鼠促卵泡素(FSH)規(guī)格：96T/48T

6β-羥基依普利酮  6β-Hydroxy Eplerenone  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatFXELISAKit大鼠凝血因子X(FX)規(guī)格：96T/48T

依普利酮醇酸鉀鹽   Eplerenone Hydroxyacid Potassium Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Ratf-β-HCGELISAKIT大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-β-HCG)規(guī)格：96T/48T

4-氧*度酸  4-Oxo Etodolac  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格：96T/48T

N-甲基*度酸  N-Methyl Etodolac  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatGADELISAKit大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD)規(guī)格：96T/48T

依維莫司-d4  Everolimus-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格：96T/48T

D 13223-d4 (氟吡汀代謝產(chǎn)物)   D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite)   質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格：96T/48T
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞提取物 Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4    Humanenkephalin,ENKELISA試劑盒人腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Odoroside H  18810-25-8  中文名：  分子式：C30H46O8    組織PKCζ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Neridienone B  61671-56-5  中文名：  分子式：C21H28O4    HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Neritaloside  465-13-4  中文名：  分子式：C32H48O10    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16    Human thymus activation regulated chemokine (TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒