大鼠肺大動脈組織提取物說明書

大鼠肺大動脈組織提取物【Rat Lung: Normal Artery Derivatives】

肺大動脈管壁分為內(nèi)膜、中膜和外膜，各層結(jié)構(gòu)隨動脈分支而變化，以中膜變化大，其管壁含大量彈性膜和彈性纖維。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠肺大動脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

BM100 DNA Marker2ul×4支Ethyl β-D-xylopyranoside67432

2ul×支15,16-DihydroxyoctadecaZ,12Z-dienoic acid11292

DNA MarkerⅠ2ul×4支n-Butyl-β-D-fructopyranoside678847

2ul×支3'-Hydroxygynuramide II1937

DNA Marker Ⅱ2ul×4支Senkyunolide S1727238
CLIAKitforA(Mouseai-thrombieceptor)ELISAKit小鼠抗凝血酶受體規(guī)格：48T/96T  2-Amino-5-nitrothiazole  121-66-4  中文名：2-氨基-5-硝基噻唑  分子式：C3H3N3O2S 

CetylpyridniumChloride,Monohydrate   500g                 3-O-Benzyl estrone  中文名：3-O-芐基雌酚酮  分子式：C25H28O2 

CetyldimethylethylAmmoniumBromide   100g  3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  92282-70-7  中文名：3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H36O3 

Cephalexinmonohydrate   5g                 Amprolium hydrochloride  中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4 

Cellulose,Microcrystalline   100g  Androst-2-en-17-one  963-75-7  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O
莫索尼定  Moxonidine   質(zhì)量規(guī)格：度>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 96T/48T

莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Moxonidine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA檢測試劑盒Ratosteonectin,ONELISAKit 96T/48T

奈帕芬胺  Nepafenac  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠固酮(ALD)ELISA檢測試劑盒rataldosterone,ALDELISAKit 96T/48T

奈帕芬胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Nepafenac  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠固酮(ALD)試劑盒 Rat aldosterone,ALD ELISA Kit

尼卡巴嗪   Nicarbazin   質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA檢測試劑盒RatCaspase3,Casp-3ELISAKit 96T/48T

鹽酸尼莫司汀  Nimustine HCl(ACNU)  質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA檢測試劑盒RatCaspase-9,Casp-9ELISAKit 96T/48T

BEZ235 (Dactolisib)  NVP-BEZ 235  質(zhì)量規(guī)格：>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑 大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA檢測試劑盒RatComplemefragme4a,C4aELISAKit 96T/48T

吡嘧司特鉀  Pemirolast potassium  質(zhì)量規(guī)格：>98% 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA檢測試劑盒Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 96T/48T

培哚普利  Perindopril erbumine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,鹽形式 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA檢測試劑盒RatPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 96T/48T

保泰松  phenylbutazone  質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP 大鼠合成酶(NOS)ELISA檢測試劑盒Ratniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T
大鼠肺大動脈組織提取物說明書豚鼠白介素6elisa試劑盒   豚鼠白介素6試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠白介素6試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠白介素6試劑盒、豚鼠白介素6eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Alogliptin  850649-61-5  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒     Aloe-emodin  481-72-1  中文名：蘆薈大黃素  分子式：C15H10O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠白介素6(IL-6)ELISAKit     Aloin  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9  度：97.5%

豚鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒     Aloe-emodin  481-72-1  中文名：蘆薈大黃素  分子式：C15H10O5 

豚鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-Amino-9H-fluoren-9-one  3096-57-9  中文名：2-氨基-9H-芴-9-酮  分子式：C13H9NO  度：99.0%  關(guān)鍵詞：