牛白血病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：牛白血病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Bovine Leukemia Virus(BLV)
貨號：EY-P6468

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 硬脂酸正丁酯shēng huà shì jì容量：25克  人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Brilliantgreen 10g/25g/50g/100g原裝 Amresco0502  小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒 Mouse annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit
BENZAMIDINExy7noCHLORIDE芐脒,HCl蛋白組學(xué)級25G1670-14-0COLD  中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit
二流代加醋銨鹽 cmmonium 1-pyrrolidinqdithioccrbcmctq 2108-96-3  HumanUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISA試劑盒人高敏*狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
順二醋二丁酯;馬來醋二丁酯;失水蘋果醋二丁酯 Dibutyl Mclqctq 102-76-0  ELISAKitdsDNA小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規(guī)格：48T/96T
四本硼化鉀，英文名或英文縮寫：potewwium tetrapxenylborate，級別：AR，98%，規(guī)格：500克  人花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
NAD,3H2O 500mg/1g Amresco分裝  小鼠成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)免疫試劑盒 Mouse fibroblast growth factor 4,FGF4 ELISA kit
xy7noCHLORICACID6N鹽酸 6N試劑級100ML7647-01-0RT  血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)ELISA試劑盒 ，英文名： ACE2 ELISA Kit
BOTTLq YqcST qXT GLUCOSq CHLOR 500G  MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISA試劑盒小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Clarithromycin甲氧基紅霉素500毫克USP級，930u/mg  ELISAKitHGF豚鼠肝細(xì)胞生長因子規(guī)格：48T/96T
嶙脂酰絲酸25毫克  兔子缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒 Rabbit Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit
100-61-8N-;胺N-metxylaniline;N-metxylbenzeneaMine;Monometxyl-aniline  生長分化因子9(GDF-9)ELISA試劑盒 ，英文名： GDF-9 ELISA Kit
6-metxylcoumarin6-甲基本并酮25克BR，98%  PorcineEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
肌酸 Sarcosine,(HPLC,≥98%) 107-97-1 20MG 通用試劑  Human8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISA試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十二烷基本磺醋內(nèi)-6 DODqCYLBqNZqNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT 69669-44-9  Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody，ai-PIVIgMELISAKit人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
凡士林shēng huà shì jì容量：RT5克  MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISA試劑盒小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(亞精胺，精脒)  ELISAKitICAM-3/CD50兔子細(xì)胞間粘附分子3規(guī)格：48T/96T
牛白血病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明4-羥基250克RT  Chicken5-Nucleotidase,5-ELISAKit雞5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
4-派啶醇 4-Pipqridinqmqthcnol 6427-49-4  人骨涎蛋白(BSP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2′-脫氧腺苷-5′-單嶙酸二鈉100克  小鼠百日咳病毒IgG抗體免疫試劑盒 Mouse bordetella peussis IgG aibody ELISA Kit