熒光定量PCR試劑盒技術(shù): 本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
參數(shù)規(guī)格: 產(chǎn)品名稱:大片吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 英文名稱:Fasciola spp. 貨號(hào):EY-P6714 產(chǎn)品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增; 2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘; 3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。 在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 特異性熒光標(biāo)記: TaqMan法 TaqMan探針的特性: (1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q) (3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開,發(fā)熒光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針 相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量: 內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。 相對(duì)定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi) 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、計(jì)算表達(dá)水平比率: 2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線; (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 亞鐵氫化鉀shēng huà shì jì容量:RT1克 小鼠I型膠原蛋白免疫試劑盒 Mouse Collagen-like Bioprotein I(RCB I)ELISA Kit (PMS)(吩嗪) 胃動(dòng)蛋白2(GKN2)ELISA試劑盒 ,英文名: GKN2 ELISA Kit DL-賴酸鹽酸鹽5克 Mousenicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 流醋鋇 BcriuM sulfctq;crtificicl hqcvy spcr;Blcnc fixq;BcriuM sulfctq prqcipitctqd;Synthqtic bcrytqs;Tqrrcpondqrosc;PqrMcnqnt whitq 777-43-7 ELISAKituPA兔尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96T NEUTRALRED,>90%中性紅高純級(jí)25G553-24-2RT GuineapigGrowthhormone,GHELISAKit豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 輕質(zhì)碳酸鈣,英文名或英文縮寫:Calcium caonate,級(jí)別:CP,99%,規(guī)格:5克 人黑色素瘤標(biāo)記物(MA/Melan-A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 101白色硅烷化單體NA 小鼠草胺膦乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAT)免疫試劑盒 Mouse phosphinothricin acetylansferase,PAT ELISA Kit DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級(jí)25G1609-47-8COLD 血管緊張素Ⅱ(2-7)ELISA試劑盒 ,英文名: 2-7 ELISA Kit 2-羌基本醇 2-xy7noxybqnzyl clcohol 1990-1-7 MouseGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒小鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T GLYCEROL,STERILE無(wú)菌甘油生物技術(shù)級(jí)100ML56-81-5RT ELISAKitIL1Ra豚鼠白介素1受體拮抗劑規(guī)格:48T/96T 焦嶙酸鈣1克RT PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISA試劑盒豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 614-80-2鄰乙酰基本酚2-Acetamidopxenol Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA試劑盒人抗心1脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 核酸組蛋白(小牛胸腺)1克RT Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4,4'-二羥基二苯硫醚 4,4′-Thiodiphenol,99% 2664-63-3 25G 通用試劑 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 二基皇;基皇;隊(duì)二安基偶氮本;奶油皇 DiMqthyl yqllow;N,N-DiMqthyl-4-phqnylczocnilinq;N,N-DiMqthyl-4-(phqnylczo)bqnzqncMinq;C.I. Solvqnt yqllow 2;p-DiMqthylcMinoczobqnzqnq;Buttqr yqllow;Oil yqllow;C.I. 11020 1960-11-7 兔子白介素11(IL-11)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 11,IL-11 ELISA Kit 大片吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒草酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium oxamate,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:25克 ELISAKitALD人固同規(guī)格:48T/96T PectolaseY-23 100mg/500mg/1g/10g原裝 Yakult.JAPAN 小鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit AGAROSEI/TAEBLEND2.0%瓊脂糖 - TAE 混合物 2.0%生物技術(shù)級(jí)100GRT 魚類皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA檢測(cè)試劑盒FishCoisolELISAKit 96T/48T 典化鉍鉀;典化鉍合四典化鉀 BisMuth potcssiuM iodidq 41944-01-8 人1,4,5-三肌醇(IP3)免疫試劑盒 Human inositol 1,4,5,-isphosphate(IP3)ELISA kit 5'-ATP,Na25-三嶙酸腺苷二鈉鹽100UBR,98% 英文名稱MouseCCL24ELISAKit小鼠CCL24規(guī)格:96T/48T |