大鼠結腸平滑肌細胞提取物說明書

大鼠結腸平滑肌細胞提取物【Rat Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives】

大鼠結腸平滑肌細胞提取物是從大鼠結腸平滑肌細胞提取的，大鼠結腸平滑肌細胞從正常大鼠結腸組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

艱難梭菌tcdB基因實時熒光PCR檢測試劑盒TTetraethyl ranelate581946

艱難梭菌tcdE基因實時熒光PCR檢測試劑盒TTetracycline4四環素

彌散粘附性大腸埃希氏菌（DAEC）實時熒光PCR檢測試劑盒TTetracaine944丁卡因

中東呼吸道綜合征(MERS)病毒雙重實時熒光PCR篩查試劑盒TTetracaine hydrochloride1367鹽酸丁卡因

黃熱病毒實時熒光PCR檢測試劑盒TTetrabromobisphenol A diallyl ether253279四溴雙酚 A 雙烯丙基醚
HumanMousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2-Amino-6-methylbenzothiazole  中文名：2-氨基-6-甲基苯并噻唑  分子式：C8H8N2S  度：98.0%

Humanmitoticspindleapparatusaibody,MSAELISAKit 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine hydrochloride  139525-77-2  中文名：  分子式：C13H16ClNO  度：98.0%  關鍵詞： 

HumanmembraneIgA,mIgAELISAKit 人表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  4442-54-0  中文名：1,4-苯并二氧六環-6-羧酸  分子式：C9H8O4  度：98.0%  關鍵詞： 

HumanLDL-ICELISAKit 人低密度脂蛋白復合物(LDL-IC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-Acetoxy-9,17-octadecadiene-12,14-diyne-11,16-diol  中文名：  分子式：C20H28O4  度：%

HumanLactoferrinaibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O  度：94.0%  關鍵詞：  抗菌; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
烏藥醇 HPLC≥98% 10mg HumanFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

烏藥醚內酯 HPLC≥98% 20mg Humanfocaladhesionkinase,FAKELISAKit 人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

無梗五加苷B HPLC≥98% 20mg humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

無水檸檬酸 HPLC≥98% 100mg HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISAKit 人游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

吳茱萸堿 HPLC≥98% 20mg humanfreeEsiol,FE3ELISAKIT 人游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

吳茱萸堿 HPLC≥98% 20mg HumaNFrelatedactivationinducedcytokine,ANCEELISAKit人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(ANCE)ELISA試劑盒規格：96T/48T

吳茱萸內酯 HPLC≥98% 20mg Humangalactose-6-sulphatesulphatase,Gal-6SELISAKit 人半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

吳茱萸新堿 HPLC≥98% 10mg HumanGasicMucin,GMELISAKit 人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

吳茱萸總堿 HPLC≥98% 20mg humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

五O乙酰基βD吡喃葡萄糖 GC≥99% 20mg Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit 人葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
大鼠結腸平滑肌細胞提取物說明書人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISAKit                 3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  中文名：  分子式：C17H23NO5 

人多藥耐藥相關蛋白1(MRP1)酶聯吸附測定試劑盒   Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit  2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6  度：98.0%

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit     Timosaponin B-II  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19 

人抵抗素(Resistin)ELISAKIT     3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名：  分子式：C20H24O3 

人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISAKit     3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol  899822-99-2  中文名：  分子式：C19H31NO5