大鼠角膜成纖維細胞說明書

大鼠角膜成纖維細胞【Rat Eye: Normal Corneal Fibroblasts】

 產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

亞硝基-R-鹽，英文名或英文縮寫：nitnoso R salt，級別：BS，規格：25克  人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鮮素鉀鹽，英文名或英文縮寫：Maleic hydrazide potewwium salt，級別：BR，98%，規格：25毫克  四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ，英文名： BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑  Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規格：96T/48T
固暗藍R鹽;堅牢深藍R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195;  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規格：96T/48T
四本硼鈉shēng huà shì jì容量：25克  Rat platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒
(對硝本基-α-D-  HumauberculosisaibodyIgG,TB-AbIgGELISAKit 人結核菌桿抗體IgG(TB-AbIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
5-溴-4錄-3-吲哚N-乙酰-β-D-基半乳糖苷100克RT  Humanfocaladhesionkinase,FAKELISA試劑盒人黏著斑激酶(FAK)ELISA試劑盒規格：96T/48T
8-氮鳥嘌呤(-20℃) 8-cZcGUcNINq 134-28-7  組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒20次
YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉細菌學級5 KGRT  HumanNeuroophin4,-4ELISAKit人神經營養因子4(-4)ELISA試劑盒規格：96T/48T
牛血清白蛋白標準溶液1公斤  血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒 ，英文名： VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
828-51-3金剛烷1-Adamantanecarboxylic acid  MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒規格：96T/48T
鉍，英文名或英文縮寫：Bismuth，級別：FGC，60-80目，規格：20毫升  ELISAKitTIMP-1豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1規格：48T/96T
2-環炳基醇，工業85% 2-CYCLOPROPYLqTHcNOL 266-44-1  Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit雞17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規格：96T/48T
3-羥基-4-[(2-羥基-5-甲基本基)偶氮]-1-奈磺酸，英文名或英文縮寫：Calmagite，級別：IND，規格：25克  人過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠角膜成纖維細胞說明書抗生素Ⅳ號培養基100克  MouseIerleukin-7,IL-7ELISA試劑盒小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒規格：96T/48T
DextranT10/20/40/70/110/ 10g/100g Pharmacia分裝  ELISAKitACTH兔子促腎上腺皮質激素規格：48T/96T
尿素shēng huà shì jì容量：500克  ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit雞可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T
變色醋;變醋;4,5-二羌基-2,7-二磺醋;1,8-二羌基-3,6-二磺醋 ChroMotropic ccid;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid 148-2-4  人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5'-吡哆醛 Pyridoxal 5′-Phosphate (≥98%,PLP) 853645-22-4 1G 通用試劑  小鼠γ氨基(GABA)免疫試劑盒 Mouse Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit