產品名稱 | 大鼠食管組織提取物培養 | 英文名稱 | Rat Esophagus: Normal Esophageal Derivatives | 貨號 | EYX99429 |
大鼠食管組織提取物【Rat Esophagus: Normal Esophageal Derivatives】 食管為前、后扁窄的肌性管道,按其行程可分為頸部、和腹部三部。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠食管組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點; 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 Casein enzymatic hydrolysate酶水解酪蛋白 0g2,2-Bis(4-chlorophenyl),1-dichloroethylene7252,2-雙(4),1-二氯乙烯 Casein 酪蛋白 0g 2,2-Bis(4-chlorophenyl),1-dichloroethane7242,2-雙(4-氯),1-二氯乙烷 CDP 5’-二磷酸胞苷鈉鹽水合物 mg2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane2482,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 Cefotaxime Salt噻孢霉素鈉鹽/頭孢噻肟鈉鹽 5g /25g /g 2,2-Bis(3-amino-hydroxyphenyl)hexafluoropropane8355872,2-雙(3-氨基-羥苯基)六氟丙烷 CHAPS 1g/5g2,2'-Biquinoline11912,2'-聯 Clopidogrel bisulfate 中文名:硫酸氫氯吡格雷 分子式:C16H18ClNO6S2 度:98.0% 肺表面活性物質相關蛋白 A(SP-A) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Cefotaxime 中文名:頭孢噻肟鈉 分子式:C16H17N5NaO7S2 度:98.0% 胸腺和活化調節趨化因子 (TARC) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Triamcinolone acetonide 中文名:曲安奈德 分子式:C24H31FO6 度:98.0% 胸腺表達化學因子 (TECK) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Tryptophan 中文名: 分子式:C11H12N2O2 度:98.0% 酰基轉移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine 中文名: 分子式:C7H9Cl2N3S 度:98.0% 脫羧酶(PDC)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣 木栓酮(標準品) FRIEDELIN 質量規格:鑒別 小鼠斯鈣素1(STC1)ELISA試劑盒 ,英文名: STC1 ELISA Kit 表木栓醇(標準品) FRIEDELAN-3BETA-OL 質量規格:鑒別 小鼠死亡關聯蛋白激酶1(DAPK1)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK1 ELISA Kit 老龍皮酸;網脊衣酸 A(標準品) (4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid 質量規格:鑒別用 小鼠死亡關聯蛋白激酶3(DAPK3)ELISA試劑盒 ,英文名: DAPK3 ELISA Kit 焦性沒食子酸(標準品) Pyrogallol 質量規格:含量測定 小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA試劑盒 ,英文名: TSPAN30 ELISA Kit 正十九烷(標準品) N-NONADECANE 質量規格:內標 小鼠松弛肽(RLN)ELISA試劑盒 ,英文名: RLN ELISA Kit 正十五烷(標準品) N-PENTADECANE 質量規格:內標 小鼠速激肽受體1(TACR1)ELISA試劑盒 ,英文名: TACR1 ELISA Kit 咖啡酸乙酯(標準品) ETHYL CAFFEATE 質量規格:含量測定 小鼠速激肽受體2(TACR2)ELISA試劑盒 ,英文名: TACR2 ELISA Kit 檸檬酸無水 Citric acid 質量規格:>99%,AR 小鼠酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 檸檬酸無水(標準品) Citric acid 質量規格:含量測定 小鼠酸激酶(PK)ELISA試劑盒 ,英文名: PK ELISA Kit 硫酸鉀(標準品) Potassium sulfate 質量規格:含量測定 小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒 ,英文名: M2-PK ELISA Kit 大鼠食管組織提取物培養豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-Acetylbutyrolactone 中文名:2-乙酰基丁內酯 分子式:C6H8O3 度:98.0% 豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit 2-Acetyl-6-methoxynaphthalene 3900-45-6 中文名:6-甲氧基-2-乙酰萘 分子式:C13H12O2 度:99.0% 關鍵詞: 豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL10 ELISA Kit 2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione 中文名:2-乙酰基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮 分子式:C10H7NO3 度:93.0% 豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit 2-Acetonaphthone 1993/8/3 中文名:2'-萘乙酮 分子式:C12H10O 度:98.0% 關鍵詞: 豚鼠白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit 2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 度:99.0% 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |