大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取物

大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取物【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives】

大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取物是從大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取的，大鼠小腸平滑肌細(xì)胞從正常大鼠小腸組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

甲氧芐氨嘧啶 ELISA試劑盒96TMethyl 4-O-feruloylquinate19572

西馬特羅 ELISA試劑盒96TMethyl 4'-methylbiphenyl-carboxylate1147724

氟甲喹 ELISA試劑盒96TMethyl 4'-bromomethyl biphenyl-carboxylate1147728

恩諾沙星 ELISA試劑盒96TMethyl 3-cyclopropyl-oxopropionate322495

蜂蜜總抗 ELISA試劑盒96TMethyl 3-amino-[[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]amino]benzoate13648
HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  12-Aminolauric acid  693-57-2  中文名：12-氨基十二酸  分子式：C12H25NO2  度：98.0%   

Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人球蛋白輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  138213-63-5  中文名：  分子式：C31H38O18  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

Humanisletcellaibody,ICAELISAKit 人胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  (-)-Phaselic acid  423170-79-0  中文名：  分子式：C13H12O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-jELISAKit 人球蛋白j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  中文名：  分子式：C29H36O17  度：95.0%

Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene  3073-87-8  中文名：1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯  分子式：C26H20N2O2  度：%  關(guān)鍵詞：
維生素K HPLC≥98% 20mg humandopamine,DAELISAKIT 人多巴胺(DA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

維生素U HPLC≥98% 20mg Humandopaminedecarboxylase,DDCELISAKit 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

維司那定 HPLC≥98% 20mg Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

偽金絲桃素 HPLC≥98% 20mg Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

偽綿馬素 HPLC≥98% 20mg Humandynorphin,DynELISAKit 人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

偽原薯蕷皂苷 HPLC≥97% 20mg HumanElastinELISAKit 人彈性蛋白(Elastin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

衛(wèi)矛醇 HPLC≥98% 20mg Humaneyemuscleaibody,EMAbELISAKit 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

文多靈 HPLC≥98% 20mg HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

沃塔紫杉醇 HPLC≥98% 20mg Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

烏苯美司 HPLC≥98% 20mg HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
大鼠小腸平滑肌細(xì)胞提取物人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISAKit     2-Benzylsuccinic acid  3972-36-9  中文名：  分子式：C11H12O4 

人谷胱甘肽(GSH)ELISAKit     2-Benzylacrylic acid  中文名：  分子式：C10H10O2  度：98.0%

人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISAKit     2-Methyl-4-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H7NO4  度：98.0%

人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISAKit                 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H7NO4 

人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISAKit                 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  中文名：  分子式：C11H13N3S