人食管癌組織源細胞提取物

人食管癌組織源細胞提取物【Human Cancer: Esophageal Cancer Tissues Cells Derivatives】

人食管癌組織源細胞提取物是從人原代食管癌組織源細胞提取的，人原代食管癌組織源細胞從人食管癌組織制備。人食管癌組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

人副流感病毒4型單重熒光PCR檢測試劑盒48Lynestrenol526利奈孕醇

（HCoV）通用單重熒光PCR檢測試劑盒48Norethindrone682炔諾酮

（SARS）單重熒光PCR檢測試劑盒48Allylestrenol432-烯丙雌醇

（HKU）單重熒光PCR檢測試劑盒48Estradiol diproppionate1138二雌二醇

（OC43）單重熒光PCR檢測試劑盒48Estradiol-benzoate7-butyrate6428雌二醇-苯甲酸7-丁酸酯
Methyl chlorogenate  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9    豬白介素1αelisa試劑盒   豬白介素1α試劑盒   規格型號：96T/48T   豬白介素1α試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬白介素1α試劑盒、豬白介素1αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Methyl 4-O-feruloylquinate  中文名：  分子式：C18H22O9    豬γ干擾素elisa試劑盒   豬γ干擾素試劑盒   規格型號：96T/48T   豬γ干擾素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬γ干擾素試劑盒、豬γ干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H14O2    豬白介素2(IL-2)ELISA試劑盒  

Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H13BrO2    豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒  

Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  中文名：  分子式：C7H10O3    豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
鹽酸普羅帕酮  Propafenone Hydrochloride  質量規格：>98%,BR 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-2 ELISA Kit

呫噸酸（標準品）  Xanthene-9-carboxylic acid  質量規格：供檢查用 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-3 ELISA Kit

呫噸酮（標準品）  Xanthone  質量規格：供HPLC法有關物質檢查用 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甲基丁香酚（標準品）  Methyl eugenol  質量規格：含量測定 小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-4 ELISA Kit

香葉醇（標準品）  Geraniol  質量規格：含量測定 小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-5 ELISA Kit

（標準品）  Benzaldehyde  質量規格：含量測定 小鼠水通道蛋白9(AQP-9)ELISA試劑盒 ，英文名： AQP-9 ELISA Kit

卡維丁（標準品）  Cavidine  質量規格：含量測定 小鼠絲切蛋白1(CFL1)ELISA試劑盒 ，英文名： CFL1 ELISA Kit

5-羥色胺鹽酸鹽（標準品）  Serotonin hydrochloride   質量規格：含量測定 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 ，英文名： STK ELISA Kit

月見草油（標準品）  Evening primrose oil  質量規格：鑒別 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

龍血素A（標準品）  Loureirin A   質量規格：含量測定 小鼠絲酸轉肽酶抑制劑Kazal type 3(SPINK3)ELISA試劑盒 ，英文名： SPINK3 ELISA Kit
人食管癌組織源細胞提取物Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠卵泡休止素   英文名稱：   Mouse Follistatin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠叉頭框蛋白O3   英文名稱：   Mouse Forkhead Box protein O3   規格：   48T/96T   英文縮寫：   FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA試劑盒  

Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠脂多糖（LPS）ELISA試劑盒  

Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6  度：%  關鍵詞：  抗菌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。