產品名稱 | 大鼠直腸平滑肌細胞提取物價格 | 英文名稱 | Rat Intestine: Normal Rectal Smooth Muscle Cell Derivatives | 貨號 | EYX99204 |
大鼠直腸平滑肌細胞提取物【Rat Intestine: Normal Rectal Smooth Muscle Cell Derivatives】 大鼠直腸平滑肌細胞提取物是從大鼠直腸平滑肌細胞提取的,大鼠直腸平滑肌細胞從正常大鼠直腸組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 甲型H1N1流感病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48EzetimibeBBP298依澤替米貝 季節性H1流感病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Imatinib mesylate21277伊馬替尼 季節性H3流感病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Imatinib1524595伊馬替尼 甲型H3N2流感病毒雙重熒光PCR 檢測試劑盒48Mitiglinide calcium1455251米格列奈鈣 H7N9病毒雙重熒光PCR 檢測試劑盒489-Aminominocycline hydrochloride1499341 Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit 人球蛋白重鏈(IgH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式:C12H12N2O2 度:98.0% humanImmunoglobulinE,IgEELISAKit 人球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 1-Testosterone 中文名:1-睪酮 分子式:C19H28O2 度:98.0% Humanhiston-H2bELISAKit 人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 1-Indanone 中文名: 分子式:C9H8O 度:98.0% Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/ai-RA33-aibody,hNP/RA33ELISAKit 人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 90719-32-7 中文名:(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮 分子式:C10H11NO2 度:98.0% HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 1,2-Bis(phenylthio)ethane 中文名:1,2-雙(苯硫基)乙烷 分子式:C14H14S2 度:98.0% 維生素E Vitamin E 質量規格:美國進口 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA檢測試劑盒PorcineIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit 96T/48T D-α-生育酚琥珀酸鹽 D-α-Tocopheryl Succinate 質量規格:美國進口 豬白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit 96T/48T (+)-α-生育酚醋酸鹽 (+)-α-Tocopherol acetate 質量規格:美國進口 豬白介素1α(IL-1α)ELISA檢測試劑盒PorcineIerleukin1α,IL-1αELISAkit 96T/48T ent-那格列奈 ent-Nateglinide 質量規格:美國進口 豬補體蛋白3(C3)ELISA檢測試劑盒PorcineCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T ent-那格列奈酰基-β-D-葡萄糖苷酸 ent-Nateglinide Acyl-β-D-glucuronide 質量規格:美國進口 豬腸三葉因子(ITF)ELISA檢測試劑盒PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 96T/48T 那格列奈酰基-β-D-葡萄糖苷酸 Nateglinide Acyl-β-D-glucuronide 質量規格:美國進口 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA檢測試劑盒PorcinelisteriolysinELISAKit 96T/48T 4-羥苯基馬拉維若 4-Hydroxyphenyl Maraviroc 質量規格:美國進口 豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA檢測試劑盒PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T 依澤替米貝酮 Ezetimibe Ketone 質量規格:美國進口 豬壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T 3-O-乙酰依澤替米貝 3-O-Acetyl Ezetimibe 質量規格:美國進口 豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測試劑盒PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T 依澤替米貝羥基β-D-葡萄糖苷酸 Ezetimibe Hydroxy β-D-Glucuronide 質量規格:美國進口 豬皮質酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測試劑盒PorcineCoicosterone,COELISAKit 96T/48T 大鼠直腸平滑肌細胞提取物價格人肌聯蛋白 英文名稱: Human titin 規格: 48T/96T 英文縮寫: TTN Rivaroxaban 366789-02-8 中文名:利伐沙班 分子式:C19H18ClN3O5S 度:98.0% 關鍵詞: 人骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit Thiamphenicol 15318-45-3 中文名:甲砜霉素 分子式:C12H15Cl2NO5S 度:98.0% 關鍵詞: 人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit 3,3'-Sulfonyldianiline 中文名:3,3'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0% 人骨膠原交聯(Cr)ELISAKit 2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate 95-30-7 中文名:二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯 分子式:C12H14N2S3 人骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit 3,3'-Sulfonyldianiline 中文名:3,3'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |