大鼠滑膜組織提取物說明書

大鼠滑膜組織提取物【Rat Bone Joint: Normal Synovial Derivatives】

正常大鼠滑膜組織主要功能：（1）產(chǎn)生潤(rùn)滑液成分，并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤(rùn)滑液交換有關(guān)。（2）是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠滑膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

Anti-TNFα單克隆抗體大于1mg9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene11734429,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴

Anti-IL6R單克隆抗體大于1mg9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene323619,9-雙(4-羥苯基)芴

Anti-IL12單克隆抗體大于1mg9,9-Bis(4-amino-methylphenyl)fluorene7934,9-雙(4-氨基-甲苯基)芴

IL2(human、his標(biāo)簽）0ug9,17-Octadecadiene2,14-diyne,11,16-triol211238-

IL2(human、無標(biāo)簽）0ug9,16-Dioxo0,12,14-octadecatrienoic acid21786
Cleroindicin F  189264-47-9  中文名：  分子式：C8H10O3  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  臭牡丹; 長(zhǎng)管大青; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit   ELISA.   96T

Cleroindicin E  165197-71-7  中文名：  分子式：C8H14O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  長(zhǎng)管大青; 老鴉煙筒花; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISAKit              

Cleroindicin D  189264-45-7  中文名：  分子式：C8H12O4  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  長(zhǎng)管大青; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠皮質(zhì)醇elisa試劑盒   小鼠皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠皮質(zhì)醇試劑盒、小鼠皮質(zhì)醇elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Cleroindicin C  183626-28-0  中文名：  分子式：C8H12O3  度：%  關(guān)鍵詞：  長(zhǎng)管大青; 老鴉煙筒花; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒   小鼠牛血清白蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠牛血清白蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛血清白蛋白試劑盒、小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Cleroindicin B  107389-91-3  中文名：  分子式：C8H14O3  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  紅波羅花; 長(zhǎng)管大青; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒、小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
滅草煙,咪唑煙酸  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格：>98% 石蠟切片軟骨組織染色試劑盒50

咪唑煙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Imazapyr acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 調(diào)料D-葡萄糖酸內(nèi)脂比色法定量檢測(cè)試劑盒20

石膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lithocholic Acid  質(zhì)量規(guī)格：>97(GC),標(biāo)準(zhǔn)品 調(diào)料D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測(cè)試劑盒20

氧嗪酸鉀  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格：>98% 調(diào)料D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20

氧嗪酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Potassium Oxonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 調(diào)料L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20

異丁司特  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格：>98% 調(diào)料比色法定量檢測(cè)試劑盒20

異丁司特(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ibudilast  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 調(diào)料谷氨酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20

吉西他濱  Gemcitabine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,free base 調(diào)料三醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20

沙利度胺（反應(yīng)停）  Thalidomide   質(zhì)量規(guī)格：>98% 調(diào)料乙醇比色法定量檢測(cè)試劑盒20

沙利度胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  Thalidomide   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 調(diào)料乙酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20
大鼠滑膜組織提取物說明書豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒     Aminophenazone  中文名：  分子式：C13H17N3O  度：98.0%

豚鼠端粒酶(TE)ELISAKit     Ambroxol hydrochloride  中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O  度：98.0%

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4elisa試劑盒   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒、豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ambroxol hydrochloride  23828-92-4  中文名：鹽酸氨溴索  分子式：C13H19Br2ClN2O 

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒              Aminophenazone  中文名：  分子式：C13H17N3O 

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit     Allylestrenol  432-60-0  中文名：烯丙雌醇  分子式：C21H32O