產品名稱 | 大鼠骨骼肌組織提取物 | 英文名稱 | Rat Muscle: Normal Skeletal Derivatives | 貨號 | EYX99439 |
大鼠骨骼肌組織提取物 【Rat Muscle: Normal Skeletal Derivatives】 骨骼肌借肌腱附著于骨,每塊肌均由平行排列、細長的肌纖維束構成。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠骨骼肌組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點; 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 Anti-Plant Actin 抗體 μl 3-Quinuclidinone373183-奎寧環酮 Anti-RbcL subunit of RuBisCO antibody/Anti-RbcL抗體 μl 3-Oxo-aza-alpha-androstane7β-carboxylic acid33355 兔抗 GAPDH多克隆 IgG 抗體 μl3-O-Methyl-Estrone162423-氧甲基基雌酮 AP標記山羊抗兔IgG 0μl 3-O-Methyl-methoxymaxterone92283-O-甲基-甲氧基α-雄烷二醇 生物素標記山羊抗兔IgG(H+L) 1ml 3-O-Benzyl estrone85883-O-芐基雌酚酮 Cleroindicin E 165197-71-7 中文名: 分子式:C8H14O3 HumanDickkopf1,DKK1ELISA試劑盒人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒規格:96T/48T Methyl levulinate 624-45-3 中文名: 分子式: 組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 Cleroindicin C 183626-28-0 中文名: 分子式:C8H12O3 HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒規格:96T/48T Cleroindicin B 107389-91-3 中文名: 分子式:C8H14O3 神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Cleroindicin F 189264-47-9 中文名: 分子式:C8H10O3 Human adaptor protease activating factor 1 (APAF1) ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 棉籽糖 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSMAF人特異性巨噬細胞武裝因子規格:48T/96T 莫諾苯宗 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSmIg人細胞膜表面球蛋白規格:48T/96T 莫諾苷 HPLC≥97% 20mg ELISAKitSOCS-3人細胞因子信號轉導抑制因子3規格:48T/96T 牡丹皮苷C HPLC≥98% 20mg ELISAKitSS人生長抑素規格:48T/96T 牡荊內酯 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSTK人絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶規格:48T/96T 牡荊素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitST人血清素/血清胺規格:48T/96T 牡荊素精銨酸鹽 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTAA人腫瘤相關抗原規格:48T/96T 牡荊素葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTACE人腫瘤壞死因子α轉化酶規格:48T/96T 牡荊素鼠李糖苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTACE人腫瘤壞死因子α轉化酶規格:48T/96T 牡荊油 HPLC≥98% 20mg ELISAKitTAFI人纖溶抑制因子規格:48T/96T 大鼠骨骼肌組織提取物 豚鼠睪激素 英文名稱: Guinea pig Testosterone 規格: 48T/96T 英文縮寫: TESTO Allyl phenoxyacetate 7493-74-5 中文名:苯氧乙酸烯丙酯 分子式:C11H12O3 豚鼠肝細胞生長因子elisa試劑盒 豚鼠肝細胞生長因子試劑盒 規格型號:96T/48T 豚鼠肝細胞生長因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠肝細胞生長因子試劑盒、豚鼠肝細胞生長因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Araliadiol 中文名: 分子式:C15H20O2 度:% 豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 Aminophylline 317-34-0 中文名:氨茶堿 分子式:C16H24N10O4 豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit Aminophenazone 58-15-1 中文名: 分子式:C13H17N3O 度:98.0% 豚鼠端粒酶elisa試劑盒 豚鼠端粒酶試劑盒 規格型號:96T/48T 豚鼠端粒酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豚鼠端粒酶試劑盒、豚鼠端粒酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Ambroxol hydrochloride 23828-92-4 中文名:鹽酸氨溴索 分子式:C13H19Br2ClN2O 度:98.0% 關鍵詞: 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |