人體胃癌組織源細(xì)胞提取物說明書

人體胃癌組織源細(xì)胞提取物【Human Cancer: Gastric Cancer Tissues Cells Derivatives】

人胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞提取物是從人原代胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞提取的，人原代胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞從人胃癌組織組織制備。人胃癌組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

人類流感病毒核酸四重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒TWallicoside887979斷節(jié)參苷

甲型H1N1亞型/季節(jié)性H3亞型/季節(jié)性H1亞型人類流感病毒三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒TVildagliptin27416維達(dá)列汀

H5/H7/H9亞型病毒三重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒TVilazodone hydrochloride1635218鹽酸維拉唑酮

中東呼吸道綜合征(MERS)病毒三重實(shí)時(shí)熒光PCR確證試劑盒Tvibo-Quercitol4886

中東呼吸道綜合征(MERS)病毒雙重實(shí)時(shí)熒光PCR篩查試劑盒文拉法辛
Methylprednisolone acetate  53-36-1  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠雙鏈DNA   英文名稱：   Double sand DNA   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   dsDNA

Methylprednisolone  83-43-2  中文名：甲基潑尼松龍  分子式：C22H30O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠多巴胺   英文名稱：   Dopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Dopamine

Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠D乳酸   英文名稱：   Mouse D Lactic Acid   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DLA

Methyl levulinate  624-45-3  中文名：  分子式：  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒  

Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：綠原酸甲酯  分子式：C17H20O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒
鹽酸普羅托平; 鹽酸藍(lán)堇堿 HPLC≥98% 20mg RatLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫水羊藿素 HPLC≥98% 20mg Ratleoopichormone,LHELISAKit大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氫丹參新酮 HPLC≥98% 20mg Ratleoopichormone,LHELISA試劑盒大鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偽石蒜堿 HPLC≥98% 20mg RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

β常春藤素 HPLC≥98% 20mg RatLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

苯甲酰新烏頭原堿鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

毛萼晶A HPLC≥95% 20mg RatLeptin,LEPELISA試劑盒大鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫氫樅醇 HPLC≥95% 20mg RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異牡荊黃素 HPLC≥98% 20mg RatLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

尾葉香茶菜戊素 HPLC≥95% 20mg RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人體胃癌組織源細(xì)胞提取物說明書Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  鱸魚皮質(zhì)醇   英文名稱：   Coisol   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CO

Olopatadine hydrochloride  中文名：鹽酸奧洛他定  分子式：C21H24ClNO3  度：98.0%  鱸魚溶菌酶/胞壁質(zhì)酶   英文名稱：   Lysozyme /Muramidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Lysozyme

Tenofovir  中文名：泰諾福韋  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Naftopidil dihydrochloride  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3  度：98.0%  細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒   48T

Zileuton  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T