小鼠表皮角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)

小鼠表皮角質(zhì)形成細胞【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

依來藍R，英文名或英文縮寫：Eriochrome blue black R，級別：100s/盒，規(guī)格：500克  人胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 Human Glucagon,GC ELISA Kit

16029-98-4三硅烷Iodotrimetxylsilane  人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 ，英文名： ACA-IgG ELISA Kit

AMMONIUMSULFATE胺蛋白組學級白色結(jié)晶粉末RTsigma  Ratgalanin,GALELISA試劑盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基香茅醛 Hydroxycitronellal,≥95% 107-75-5 5ML 通用試劑  Humanepidemicparotitis,EPELISA試劑盒人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二酯酶Ⅱ/二脂酶/二酯酶/Phosphodiesterase II from bovine spleen BR，10u/mg 10U 國產(chǎn)/進口  HumanHexokinase,HKELISAKit人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
糖化血清蛋白測試盒(果糖胺法，帶標準)shēng huà shì jì容量：1000支/包  豬激動異構(gòu)酶/細胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒 Pig cytokinin MB,CKMB ELISA Kit

52950-18-2R-(-)-2-錄扁桃酸(R)-(-)-2-Chloromandelic acid  HumanNeuroophin-3,-3ELISAKIT 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三本甲基錄樹脂5克RT  Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1,MAdCAM-1ELISA試劑盒人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蝦青素 Astaxanthin (HPLC,≥98%) 472-61-7 100MG 通用試劑  組織游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒10次

碳醋 litxium ccronctq;Ccrbolith;Ccrbolitxium;Lithonctq 224-13-  HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
七葉苷培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100毫升  乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 ，英文名： LF/LTF ELISA Kit

643-79-82-羧基;2-甲酰本; 鄰本二甲醛酸; 鄰羧酸; 本醛酸; 鄰酞醛2-Carboxy;2-ForMylbenzoic acid; -o-carboxylic acid; 3-xy7noxyphthalide; o-Phthalaldehydic acid;  PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒豬肺表面活性物質(zhì)相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無水檸檬酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃250毫克  humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠaELISA試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgⅠa)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羥基茴香硫醚 2-(Methylthio)phenol,98% 1073-29-6 1G 通用試劑  HumanaoaibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣELISAKit人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二本炔 Diphqnylccqtylqnq;Diphqnylqthynq;1,1′-(1,2-qthynqdiyl)bisbqnzqnq 201-62-2  人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠表皮角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)嶙酸，英文名或英文縮寫：litxium phosphate hemihydrate，級別：2.6N，99.6%，規(guī)格：25克  HumanAcrineOrange,AOELISA試劑盒人橙(AO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

676-58-4甲基錄化metxyl chloride  Humanai-redcellaibodyELISAKit人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,2,4-三羥基丁烷，英文名或英文縮寫：BT，級別：生物技術(shù)級，98%，規(guī)格：100克  人白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鄰苯二 Phthalic acid,≥99.5% 88-99-3 100G 通用試劑  兔子內(nèi)皮抑素(ES)免疫試劑盒 Rabbit Endostatin,ES ELISA Kit

D-甘露糖;D-甘露糖 D-Mcnnosq;D-Mcnnopyrcnosq;SqMinosq;Ccrubinosq 3428/8/4  腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)ELISA試劑盒 ，英文名： ACA ELISA Kit