人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)Human JUN MAPK ELISA Kit【實(shí)驗(yàn)用途】研究發(fā)現(xiàn),用紫外線照射細(xì)胞后,一種蛋白激酶能夠磷酸化f—jun,其磷酸化位點(diǎn)位于c—jun氨基末端活性區(qū)Set63和Ser73,該蛋白激酶被稱(chēng)為jun氨基末端激酶(jun N—terminal kinase,JNK)。JNK原來(lái)被稱(chēng)為應(yīng)激激活的蛋白激酶(SAPK)。與其他MAPK一樣,當(dāng)酪氨酸和蘇氨酸殘基發(fā)生磷酸化后,JNK/SAPK也可被激活。JNK可以受各種各樣的細(xì)胞外刺激而激活,這些刺激包括生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和細(xì)胞應(yīng)激。細(xì)胞應(yīng)激又包括熱休克、脂多糖、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素—1、高滲透壓、紫外線照射和缺血/再灌注損傷等。JNK的上游激酶包括兩個(gè)MAPKK:MKK4(SECl)和MKK7。MKK4、MKK7通過(guò)雙磷酸化JNK的蘇氨酸和酪氨酸位點(diǎn)而激活JNK,是JNK的特異性激酶。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。 人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)操作流程示意:
人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備: ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。 (1)血清 室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 (2)血漿: 應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 (3)尿液: 用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。 (4)細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。 (5)培養(yǎng)細(xì)胞 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 (6)組織標(biāo)本 切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 TRCT536670 / 5mg21905-72-6o-(p-Tolyloxy)benzoic Acid Methyl Ester2450 TRCT536652 / 1mgTolvaptan2450 TRCT536627 / 2.5mgTolycaine-d10 Hydrochloride2450 TRCT536122 / 10mgo-Toluic Acid-13C22450 TRCT535915 / 5mg7-p-Toluenesulfonylhydrazide 3β,4β-Diacetyloxy-chol-5-ene-24-carboxylic Acid Ethyl Ester2450 TRCT535873 / 1gToluene-d52450 TRCT535870 / 1L108-88-3Toluene2450 人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶*供應(yīng)規(guī)格: 96T PDGF ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子進(jìn)口/原裝供應(yīng)規(guī)格: 96T EMAb(Human eye muscle antibody) ELISA Kit 人抗眼肌抗體進(jìn)口/分裝供應(yīng)規(guī)格: 96T C1q(Human Anti-Complement 1q antibody) ELISA Kit 人抗補(bǔ)體1q抗體現(xiàn)貨供應(yīng)供應(yīng)規(guī)格: 96T OxLDL ELISA Kit ??? elisa試劑盒常見(jiàn)組成部分: 1)人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。 2)抗體:在ELISA中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。 3)抗原:在ELISA中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類(lèi),即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。 4 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測(cè)試劑盒包被:將免疫活性物質(zhì)(抗原或抗體)結(jié)合于固相載體上的過(guò)程稱(chēng)為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學(xué)交聯(lián)法及親和素-生物素間接包被法 5)固相載體:固相載體是ELISA中用以分離結(jié)合標(biāo)記物和游離標(biāo)記物的主要手段,應(yīng)與各種免疫活性物質(zhì)有良好的結(jié)合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。 公司人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無(wú)效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點(diǎn)擊了解更多人elisa檢測(cè)試劑盒。 產(chǎn)品名稱(chēng):人JUN MAPKelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 英文名稱(chēng):Human JUN MAPK ELISA Kit 規(guī)格:48T/96T 主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。 試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。 檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.. |