大鼠支氣管成纖維細胞提取物【Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblast Derivatives】 大鼠支氣管成纖維細胞提取物是從大鼠支氣管成纖維細胞提取的,大鼠支氣管成纖維細胞從正常大鼠支氣管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠支氣管成纖維細胞提取物價格 | 英文名稱 | Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblast Derivatives | 貨號 | EYX99208 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 己烯雌酚Elisa檢測試劑盒96Allyl phenoxyacetate74934苯氧乙酸烯丙酯 依維菌素Elisa檢測試劑盒962-Allylphe74512-烯丙基酚 醋酸甲羥孕酮Elisa檢測試劑盒962-Amino'-chloro-nitro benzophenone1162-氨基-硝基'-氯二苯甲酮 19-去甲睪酮Elisa檢測試劑盒966-Chloroguanine riboside04/7/16-氯鳥嘌呤核苷 孕酮Elisa檢測試劑盒96價格:¥1 / 5 mg中文名:4-(1H,2,4-三氮唑-基甲基)苯胺別名: HumanEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒人內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)-4-Methoxydalbergione 中文名:(R)-4-甲氧基黃檀醌 分子式:C16H14O3 HumanEndotheliallipase,ELELISA試劑盒人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 78606-95-9 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO HumanEndostatin,ESELISA試劑盒人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone 中文名:(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮 分子式:C13H15NO3 Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone 90719-32-7 中文名:(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮 分子式:C10H11NO2 HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (S)-4-Methoxydalbergione 中文名:(S)-4-甲氧基黃檀醌 分子式:C16H14O3 外消旋西替利嗪N氧化物(非對映) rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers) 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatDHEA-SELISAKit大鼠去氫表雄同(DHEA-S)規(guī)格:96T/48T (3R,5S)氟伐他汀鈉鹽 (3S,5R) Fluvastatin Salt 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠雙氫睪同(DHT)規(guī)格:96T/48T (3R,5S)-氟伐他汀鈉鹽 (3R,5S)-Fluvastatin Salt 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠雙氫睪同(DHT)規(guī)格:96T/48T 氟伐他汀 Fluvastatin 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)規(guī)格:96T/48T 克林沙星鹽酸鹽 Clinafloxacin Hydrochloride 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)規(guī)格:96T/48T 4-羥基左旋咪唑 4-Hydroxy Levamisole 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatDPDELISAKit大鼠脫氧吩(DPD)規(guī)格:96T/48T 氯米帕明N氧化物 Clomipramine N-Oxide 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatDPP4ELISAKit大鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T N-去甲基氯米帕明鹽酸鹽 N-Desmethyl Clomipramine Hydrochloride 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯吡格雷 Clopidogrel 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯吡格雷標記d4 Clopidogrel Labeled d4 質量規(guī)格:美國進口 英文名稱RatEndothelialniicoxidesyhase3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)規(guī)格:96T/48T 大鼠支氣管成纖維細胞提取物價格人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit Capecitabine 中文名:卡培他濱 分子式:C15H22FN3O6 人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit Tigecycline 中文名: 分子式:C29H39N5O8 人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit Tigogenin 77-60-1 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3 度:98.0% 關鍵詞: 毛地黃屬; 萬年蘭屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit Tigogenin 77-60-1 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit Tigogenin 中文名:劍麻皂素 分子式:C27H44O3 |