大鼠子宮頸組織提取物說(shuō)明書(shū)

大鼠子宮頸組織提取物【Cervix: Normal Rat Cervix Derivatives】

子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體。其上端與子宮體相連，下端深入。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠子宮頸組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

7-Hydroxy-methylcoumarin-acetic acid, succinimidyl ester25mg5-(2-Aminopropyl)-cyanoindolin-yl)propyl benzoate2394632

7-Methoxycoumarin-carboxylic acid2mg3-(5-(2-Aminopropyl)-cyanoindolin-yl)propyl benzoate (2R,3R),3-dihydroxysuccinate2394635

7-Methoxycoumarin-carboxylic acid, succinimidyl ester25mgAgomelatine1381126阿戈美拉汀

Dansyl-X, SE25mg2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate19693

NBD-X0mg1-Indanone833
Chrysophanol  481-74-3  中文名：大黃酚  分子式：C15H10O4    Humandopaminedecarboxylase,DDCELISA試劑盒人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9    組織NEK6激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Rubanthrone A  441764-20-1  中文名：  分子式：C17H14O10    HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Aloin  8015-61-0  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9    內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Aurantio-obtusin  67979-25-3  中文名：橙黃決明素  分子式：C17H14O7    People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA試劑盒E
美芬諾酮  Mephenoxalone  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人胃粘液素(GM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGasicMucin,GMELISAKit 96T/48T

大豆卵磷脂(高)  Lecithin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,BR 人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 96T/48T

蛋黃卵磷脂  Lecithin from egg  質(zhì)量規(guī)格：BR 人烯(ACR)試劑盒 Human acrolein,ACR ELISA kit

維蘭特羅  Vilanterol;GW642444  質(zhì)量規(guī)格：>98%,吸入型長(zhǎng)效β2激動(dòng)劑 人細(xì)胞相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISAKit 96T/48T

PD98059  PD-98059  質(zhì)量規(guī)格：>98%,MEK抑制劑 人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratin18,CK-18ELISAKit 96T/48T

PLX4720  PLX-4720  質(zhì)量規(guī)格：>98%，B-RafV600E抑制劑 人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratin19,CK-19ELISAKit 96T/48T

N,N-羰基二咪唑  1,1'-Carbonyldiimidazole  質(zhì)量規(guī)格：>98% 人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 96T/48T

LY2835219  LY2835219  質(zhì)量規(guī)格：>98%，CDK4 和CDK6選擇性抑制劑 人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytokeratinfragmeaigen21-1,CYFRA21-1ELISAKit 96T/48T

LEE011  LEE011  質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度特異性CDK4/6抑制劑 人細(xì)胞膜表面球蛋白(SmIg)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 96T/48T

MG132,蛋白酶體抑制劑  MG-132  質(zhì)量規(guī)格：>98%，proteasome抑制劑 人細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancytovillin/ezrinELISAKit 96T/48T
大鼠子宮頸組織提取物說(shuō)明書(shū)脫氧膽酸   10g  Amoxapine  14028-44-5  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O  度：98.0%   

脫羧酶（PDC）試劑盒   紫外分光光度法    50管/48樣  Atracurium oxalate  64228-78-0  中文名：阿曲庫(kù)胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16 

脫氫血栓素B2   英文名稱：   Human 11 dehydro Thromboxane B211   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   11-DH-TXB2  Qingyangshengenin  中文名：青陽(yáng)參苷元  分子式：C28H36O8 

豚鼠組胺elisa試劑盒   豚鼠組胺試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠組胺試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠組胺試劑盒、豚鼠組胺eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Amorolfine hydrochloride  78613-38-4  中文名：鹽酸阿莫洛芬  分子式：C21H36ClNO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒     Amorolfine  67467-83-8  中文名：阿莫羅芬  分子式：C21H36ClNO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。