大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒圖片Rat Apo-A1 ELISA Kit 產品名稱 | 大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒圖片 | 英文名稱 | Rat Apo-A1 ELISA Kit | 規格 | 48T/96T |
大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒圖片Rat Apo-A1 ELISA Kit【實驗用途】apo A1,載脂蛋白A1。 apo A1是血漿高密度脂蛋白(HDL)中的主要多肽。apo A1 基因的結構和功能令人感興趣是因為在HDL水平和冠心病間顯示的負相關性。267 個氨基酸的前體初經過細胞內與翻譯同時進行的蛋白水解酶的切割成為前apoA-I。前apoA-I 從細胞中分泌,在胸導管淋巴中以 apoA-I1 亞型被分離。apo A1 存在于血漿,經歷翻譯后蛋白酶水解加工成熟為血漿 apoA-I。溴化氰對該蛋白的切割產生4個片段,以從 Bio-Gel P-30上洗脫的順序依次稱為 CNBr I、II、III和 IV。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。。 試劑配制: 1、大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒圖片酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。 2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 樣本處理及要求: 1.大鼠載脂蛋白A1elisa檢測試劑盒圖片血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。 仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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