大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Rat Lung: Normal Artery Endothelial Cell Derivatives】 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取的,大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞從正常大鼠肺大動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物價(jià)格 | 英文名稱 | Rat Lung: Normal Artery Endothelial Cell Derivatives | 貨號 | EYX99212 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 雞傳染性支氣管炎病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Finasteride983196非那雄胺 羊口蹄疫3ABC病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Ficaprenol 112629 羊口蹄疫抗體ELISA檢測試劑盒96TFexofenadine hydrochloride15343鹽酸非索非那定 牛結(jié)核病抗體檢測試紙條卡/包,包/盒Fenticonazole nitrate731519硝酸芬替康唑 ??谔阋?/span>3ABC病毒抗體ELISA檢測試劑盒96T*2Fenofibric acid4179非諾貝特酸 Humandynorphin,DynELISA試劑盒人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,5,15-Tri-O-methylmorindol 中文名: 分子式:C18H16O6 Humandynamin2,DNM2ELISA試劑盒人發(fā)動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 138213-63-5 中文名: 分子式:C31H38O18 Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISA試劑盒人多巴胺-β羥化酶(DBH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid 4442-54-0 中文名:1,4-苯并二氧六環(huán)-6-羧酸 分子式:C9H8O4 Humandopaminedecarboxylase,DDCELISA試劑盒人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C29H36O17 HumandopamineD2receptor,D2RELISA試劑盒人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,6-Dibromopyrene 27973-29-1 中文名:1,6-二溴芘 分子式:C16H8Br2 瓦來薩明堿 N氧化物 HPLC≥98% 5mg RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 望春玉蘭脂素 C HPLC≥98% 5mg RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISA試劑盒兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 維斯體素 HPLC≥98% 5mg RabbitHeatShockProtein70,HSP-70ELISA試劑盒兔熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 委陵菜酸,Α,Α二羥基熊果酸 HPLC≥98% 5mg RabbitHeatShockProtein90,HSP-90ELISA試劑盒兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 紋香茶菜 B HPLC≥98% 5mg rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒兔子肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 紋香茶菜 E HPLC≥98% 5mg RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISA試劑盒兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 紋香茶菜 F HPLC≥98% 5mg RabbithighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 烏發(fā)醇 HPLC≥98% 5mg rabbitHistamine,HISELISA試劑盒兔子組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 烏沙甙元 HPLC≥98% 5mg rabbitHyaluronicacid,HAELISA試劑盒兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 五味子脂素 M HPLC≥98% 5mg rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISA試劑盒兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物價(jià)格人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISAKit 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 121660-11-5 中文名: 分子式:C19H16FNO 人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit 3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one 中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮 分子式:C21H34O3 人前列腺特異性抗原(PSA)ELISAKit 3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline 中文名: 分子式:C19H15BrFN 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit Tiamulin 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 人葡萄糖激酶(GCK)ELISAKit Timosaponin B-II 136656-07-0 中文名:知母皂苷B-II 分子式:C45H76O19 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 知母; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 |