大鼠腎足突基底膜組織提取物培養

大鼠腎足突基底膜組織提取物【Kidney: Normal Rat Kidney Foot Process Basement Membrane Derivatives】

腎足突基底膜是腎小球過濾膜的一部分，組成濾膜的中層。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠腎足突基底膜組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

6-TAMRA0mg2,4-Dihydroxy-nitropyridine892822

5(6)-TAMRA, SE0mg6-Amino,3-dimethyluracil66421

5-TAMRA, SE0mgMetoclopramide3642甲氧氯普胺

6-TAMRA, SE0mgAmiodarone hydrochloride197742鹽酸胺酮

5(6)-ROX25mgZidovudine5167齊多夫定
Chloramphenicol  中文名：氯霉素  分子式：C11H12Cl2N2O5  度：98.0%  豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒  

Ganciclovir  中文名：更昔洛韋  分子式：C9H13N5O4  度：98.0%  豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒  

Oxiracetam  中文名：奧拉西坦  分子式：C6H10N2O3  度：98.0%  豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒           

Piracetam  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2  度：98.0%  豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒  

Fudosteine  中文名：福多斯坦  分子式：C6H13NO3S  度：98.0%  豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒
毛地黃素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL/Fbn人纖溶酶/纖維蛋白溶酶規格：48T/96T

毛萼結甲 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPLAP人胎盤堿性0酸酶規格：48T/96T

毛鉤藤堿 HPLC≥98% 10mg ELISAKitPLGA人纖溶酶原激活劑規格：48T/96T

毛果蕓香堿 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPLGF人胎盤生長因子規格：48T/96T

毛蘭素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPlg人纖溶酶原規格：48T/96T

毛兩面針素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL人胎盤泌乳素規格：48T/96T

毛蕊異黃酮 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPL人胰脂肪酶規格：48T/96T

毛蕊異黃酮苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitpMHC人肽-MHC復合物規格：48T/96T

茅蒼術醇 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPPAR-γ兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規格：48T/96T

沒食子兒茶素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPPI人肽基脯氨酰順反異構酶規格：48T/96T
大鼠腎足突基底膜組織提取物培養微量樣品DNA提取試劑盒   50T  Androst-2-en-17-one  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%

微量二（MDA）測定試劑盒（TBA法）  Polyhydroxybutyrate  26744-04-7  中文名：聚羥基丁酸酯  分子式：C12H20O7  度：%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

微量二（MDA）測定試劑盒（TBA法）  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  2099-26-5  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4  度：98.0%  關鍵詞： 

微量DNA凝膠回收試劑盒   50T  Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  1449-61-2  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4  度：98.0%  關鍵詞： 

微晶纖維素   50g  Androst-2-en-17-one  963-75-7  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O  度：98.0%  關鍵詞：