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大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書

大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書
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產品特點:
大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等。
  大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書的詳細資料:

大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書Rat MPO  ELISA Kit【實驗用途】髓過氧化物酶(MPO)是一種血色素蛋白(分子質量 118kDa),含一對重鏈和輕鏈 ,它存于嗜中性多核細胞的嗜天青顆粒和巨嗜細胞中,其功能為將氯化物和過氧化氫轉變為次氯酸鹽。在炎癥狀態下,它被釋放入細胞外液進入循環,因此傳統認為是一種殺菌的酶,在人體的天然防御 、免疫功能方面起重要作用。此酶參與含低密度脂蛋白(1ow density li—poprotein,LDL)的脂類氧化。以鄰位二氨基苯胺鹽酸鹽為底物加過氧化氫可定量血中和組織中的酶活性。MPO能氧化低密度脂蛋白膽固醇(1ow density lipoprotein cholesterol,LD—LC),從而有利于巨噬細胞攝取LDLC并轉變為泡沫細胞 ;氧化高密度脂蛋白(hi density lipoprotein,HDL),使其失去正常的功能;另外,MPO激活金屬蛋白酶、使粥樣硬化斑塊表 面不穩定趨于破裂;同時 MPO還催化消耗 內皮衍生的一 氧化氮(nitric oxide,NO),從而減少 NO的生物利用度,損害 N0的血管擴張和抗炎功能Is]。關于 MPO的測定方法有多 種,紫外分光光度比色法、流式細胞儀和免疫組織化學染色 法 用來檢測循環中和組織中多形核細胞的 MPO活性,而 近期出現的酶聯免疫的定量法可測定血液中MPO的濃度。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。。
試劑配制:
1、大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書Rat MPO  ELISA Kit

產品名稱

大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書

英文名稱

Rat MPO  ELISA Kit

規格

48T/96T


樣本處理及要求:
1.大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
注意事項:
1.大鼠髓過氧化物酶 elisa檢測試劑盒說明書試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
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8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
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