大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞提取物 【Rat Bone: Normal Articular Chondrocyte Derivatives】 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞提取物是從大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞提取的,大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞從正常大鼠大鼠關(guān)節(jié)軟骨組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞提取物 價格 | 英文名稱 | Rat Bone: Normal Articular Chondrocyte Derivatives | 貨號 | EYX99216 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 磺胺總量Elisa檢測試劑盒96Allyl cinnamate18661肉桂酸烯丙酯 黃曲霉毒素總量Elisa檢測試劑盒962-Aminofluorene15382-氨基芴 黃曲霉毒素B1 Elisa檢測試劑盒96Allylthiourea97烯丙基 黃曲霉毒素M1 Elisa檢測試劑盒96(1R,2S)-Amino-inda30(1R,2S)-氨基-茚醇 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(嘔吐毒素)Elisa檢測試劑盒96Amitraz3891雙甲瞇 Humandermato-poin,DPTELISA試劑盒人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 18-Hydroxytritriacontan-16-one 中文名: 分子式:C33H66O2 Humandermatansulfate,DSELISA試劑盒人皮膚素(DS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1'-Acetonaphthone 941-98-0 中文名:1'-萘乙酮 分子式:C12H10O Humandeoxyuridineiphate,DPELISA試劑盒人脫氧尿三0酸(DP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1-Acetoxy-9,17-octadecadiene-12,14-diyne-11,16-diol 中文名: 分子式:C20H28O4 Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA試劑盒人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 13369-74-9 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 HumandeoxyribonucleaseⅠ,DNase-ⅠELISA試劑盒人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1-Amino-2-methylanthraquinone 中文名:1-氨基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H11NO2 脫水長春堿(標準品) Anhydrovinblastine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品 小鼠抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒 ,英文名: dsDNA ELISA Kit 長春新堿(標準品) Vincristine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA檢測試劑盒Mouseai-doublesandedDNA,dsDNAELISAKIT 96T/48T 硫酸金雀花堿;硫酸司巴丁(標準品) Sparteine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP ELISA Kit 高烏甲素(標準品) Lappaconitine 質(zhì)量規(guī)格:滴定法≥98%,標準品 小鼠抗酸性0酸酶(ACP5)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP5 ELISA Kit 番茄紅素(標準品) Lycopene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,標準品,充氮氣保護 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 苔黑酚葡萄糖苷;地衣二醇葡萄糖苷(標準品) Orcinol glucosid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP5b ELISA Kit 短葶山麥冬皂苷C(標準品) Liriope muscari baily saponins C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP-5b ELISA Kit 百兩金素A(標準品) Ardisiacrispin A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 ,英文名: aZP ELISA Kit 柳穿魚黃素(標準品) Pectolinarigenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: aZP-IgG ELISA Kit 瓜子金皂苷己(標準品) Polygalasaponin F 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 ,英文名: AMA ELISA Kit 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞提取物 價格人維生素D(VD)ELISAKit Tigecycline 220620-09-7 中文名: 分子式:C29H39N5O8 人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit 2-Benzothiazolol 中文名:2-羥基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS 人突觸足蛋白(SYNPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名: 分子式:C19H14F2O6 人鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO |