大鼠滑膜細胞提取物培養

大鼠滑膜細胞提取物【Rat Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives】

大鼠滑膜細胞提取物是從大鼠滑膜細胞提取的，大鼠滑膜細胞從正常大鼠滑膜組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

 總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

磺胺脒ELISA試劑盒N,N'-Bis(salicylidene),3-propanediamine10N,N-雙(亞水楊基),3-丙二胺

磺胺噻唑ELISA試劑盒N,N'-Bis(acetoacetyl)-o-toluidine916N,N'-雙(乙酰乙酰基)

洛美沙星ELISA試劑盒N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide18719N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺

培氟沙星ELISA試劑盒N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide421378N,N-雙(2-氯乙基)對甲苯磺酰胺

青霉素G ELISA試劑盒N-(Quinoxalin-yl)-(quinoxalin-ylamino)benzenesulfonamideNO
HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(DPD)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Benzyl D-aspartate  79337-40-9  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4 

Humandenguefeveraibody,DFELISA試劑盒人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Benzyl-5-ethoxyhydantoin  65855-02-9  中文名：1-芐基-5-乙氧基海因  分子式：C12H14N2O3 

Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISA試劑盒人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Benzylimidazole  中文名：1-芐基咪唑  分子式：C10H10N2 

HumanDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒人脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規格：96T/48T  1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名：  分子式：C9H15ClO3
脫水澤瀉醇F HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISAKit大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg Ratgalanin,GALELISA試劑盒大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

澤瀉醇 K 醋酸酯 HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去乙酰澤瀉醇O HPLC≥95% 20mg RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

刻葉紫堇胺 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒規格：96T/48T

()二氫槲皮素 HPLC≥95% 20mg RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒規格：96T/48T

桑根酮K HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

環桑素 HPLC≥95% 20mg RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

,二甲氧基,','三羥基黃酮 HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規格：96T/48T

小構樹醇A HPLC≥95% 20mg RatGelsolinELISA試劑盒大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒規格：96T/48T
大鼠滑膜細胞提取物培養人纖維蛋白(FBL)酶聯吸附測定試劑盒   Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit  3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  中文名：異綠原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%

人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯吸附測定試劑盒   Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit  3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯  分子式：C12H18O2 

人細胞外基質0酸糖蛋白elisa試劑盒   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人細胞外基質0酸糖蛋白試劑盒、人細胞外基質0酸糖蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one  1521197-43-2  中文名：  分子式：C16H15ClN4O 

人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit     2-Aminophenyl phenyl sulfide  1134-94-7  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS 

人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit     2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。