人腦膜成纖維細胞培養

人腦膜成纖維細胞【Human Brain: Normal Brain Meningeal Fibroblasts】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

月桂基基錄化，英文名或英文縮寫：DTAC，級別：高純，60%，規格：25克  CLIAKitforAZT(MouseAzidothymidine)ELISAKit小鼠疊氮胸苷規格：48T/96T

EE肉湯NA  線蟲同步化生長培養試劑盒10次

Benzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級  RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

1，2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3  豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EGF ELISA Kit

鉬 MolybdqnuM 7439-98-7  One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
戊脈安，英文名或英文縮寫：(±)-Verapamil xy7nochloride，級別：超純，80%，液體，規格：10毫克  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

固黃0NA  小鼠γ基(GABA)ELISA試劑盒 ，英文名： GABA ELISA Kit

S-本基，英文名或英文縮寫：L-Homopxenylalanine，級別：BR，98%，規格：1克  大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA檢測試劑盒RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 96T/48T

膽紅素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用試劑  人P選擇素(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒 Human P-Selectin ELISA kit

已醋醋-順式-3-己烯酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8  英文名稱MouseIgEELISAKit小鼠免疫球蛋白E(IgE)規格：96T/48T
三錄新，英文名或英文縮寫：Triclosan，級別：USP級，750mcg/mg，規格：100克  Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

(L-乳酸脫氫酶)  Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISA試劑盒人細胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

FastredBsalt1,5-disulfonate2-甲氧基-4-硝基-本重氮1,5-奈二磺酸鹽25克ACS，95%  組織基質金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量檢測試劑盒20次

一溴二錄烷 BROMODICHLOROMqTHcNq 1972/7/4  HumanLegionellapneumophilaaigen，LPAgELISAKit人軍團菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒規格：96T/48T

臺盼藍 Trypan Blue (Dye content, ≥60%) 72-57-1 5G 染色劑  人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人腦膜成纖維細胞培養麥芽糖酶，英文名或英文縮寫：γ-MDH，級別：BR，20u/ul，規格：1克  豬胱抑素C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒 Pig Cystatin-C,CST3 ELISA kit

62852-91-9姆沙伯 105CHROMOSORB(R) 105  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3-基，英文名或英文縮寫：β-Alanine，級別：BR，98%，規格：10克  HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒人N-乙?；?/span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

堿性紅1:1 Basic Red 1:1,90% 3068-39-1 25G 吸附樹脂  組織總氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20次

FTA純化 FTc Purificction Rqcgqnt  HumanFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit人游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規格：96T/48T

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。