大鼠膀胱平滑肌細胞提取物培養

大鼠膀胱平滑肌細胞提取物【Rat Bladder：Normal Bladder Derivatives】

大鼠膀胱平滑肌細胞提取物是從大鼠原代膀胱平滑肌細胞提取的，大鼠原代膀胱平滑肌細胞從正常大鼠膀胱組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

磺胺二甲基嘧啶殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cerevisterol5167啤酒甾醇

磺胺類藥物（三合一）殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cerebroside D1137739腦苷脂D

磺胺類藥物（十五合一）殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cerebroside B886426腦苷酯B

磺胺類藥物（七合一）殘留酶聯免疫檢測試劑盒Ceftiofur hydrochloride394頭孢噻呋鹽酸鹽

氟喹諾酮類藥物殘留酶聯免疫檢測試劑盒Cefquinome8495頭孢喹咪
Humancytokeratin19,CK-19ELISA試劑盒人細胞角蛋白19(CK-19)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (-)-Phaselic acid  423170-79-0  中文名：  分子式：C13H12O8 

Humancytokeratin18,CK-18ELISA試劑盒人細胞角蛋白18(CK-18)ELISA試劑盒規格：96T/48T  (+)-Noe's reagent  中文名：(+)-核歐沃豪斯效應試劑  分子式：C24H38O3 

Humancytokeratin17,CK-17ELISA試劑盒人細胞角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine hydrochloride  139525-77-2  中文名：  分子式：C13H16ClNO 

Humancytokeratin13,CK-13ELISA試劑盒人細胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline  中文名：  分子式：C10H9ClN2 

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISA試劑盒人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2,2'-Anhydro-5-methyluridine  中文名：2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷  分子式：C10H12N2O5
脫氟帕羅西汀鹽酸鹽  Defluoro Paroxetine, Hydrochloride  質量規格：美國進口 英文名稱RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70(HSP70)規格：96T/48T

帕羅西汀馬來酸鹽  Paroxetine maleate  質量規格：美國進口 英文名稱RatHeatShockProtein70ELISAKit大鼠熱休克蛋白70(HSP70)規格：96T/48T

4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸乙酯 1,1-二氧化物  4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylic acid ethyl ester 1,1-Dioxide  質量規格：美國進口 英文名稱RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物  Methyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide  質量規格：美國進口 英文名稱RatHeatShockProtein90ELISAKit大鼠熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去甲基吡羅昔康(吡羅昔康雜質B)  Desmethyl Piroxicam (Piroxicam Impurity B)  質量規格：美國進口 英文名稱Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)規格：96T/48T

甲基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物  Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide  質量規格：美國進口 英文名稱Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)規格：96T/48T

異丙基4-羥基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質I)  Isopropyl 4-Hydroxy-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity I)  質量規格：美國進口 英文名稱Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)規格：96T/48T

乙基4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物(吡羅昔康雜質 K)  Ethyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide(Piroxicam Impurity K)  質量規格：美國進口 英文名稱Rathemeoxygenase-2ELISAKit大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)規格：96T/48T

異丙基 4-羥基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸鹽 1,1-二氧化物 (吡羅昔康雜質 L)  Isopropyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide (Piroxicam Impurity L)  質量規格：美國進口 英文名稱RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧誘導因子-1α(HIF-1α)規格：96T/48T

沙卡林N-(2-醋酸異丙基酯)(吡羅昔康雜質 F)  Saccharin N-(2-Acetic Acid Isopropyl Ester)(Piroxicam Impurity F)  質量規格：美國進口 英文名稱RatHIF-1αELISAKit大鼠低氧誘導因子-1α(HIF-1α)規格：96T/48T
大鼠膀胱平滑肌細胞提取物培養人乙脫氫酶elisa試劑盒   人乙脫氫酶試劑盒   規格型號：96T/48T   人乙脫氫酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人乙脫氫酶試劑盒、人乙脫氫酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  154057-56-4  中文名：  分子式：C19H15BrFN 

人胰島素原(PI)ELISAKit     Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S  度：98.0%   

人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit                 Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S 

人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISAKit                 Timosaponin AIII  41059-79-4  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13 

人血小板生成素(TPO)酶聯吸附測定試劑盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit  2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  15873-25-3  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3