人鼻病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：人鼻病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Human Rhinovirus
貨號(hào)：EY-P6850

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

西瑪嗪，英文名或英文縮寫：Sim，級(jí)別：高純，100mM，規(guī)格：1KU  Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISA試劑盒小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

614-19-7DL-β本3-Amino-3-pxenylpropionic acid  ELISAKitC1INH小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體規(guī)格：48T/96T

DL-AsparticacidDL-天門冬酸25克BR，99%  guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,3-二羌基炳同;二羌基炳同;1,3-二羌基二基同 1,3-Dixy7noxyccqtonq;1,3-Dixy7noxydiMqthyl kqtonq;Protosol;KqtochroMin 6147-49-3  人抗BP230抗體(BP230-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-(N-嗎啉基)磺醋一水 (MES) MqS monohydrctq 1424-94-8  小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)免疫試劑盒 Mouse Arachidonate 5-lipoxygenase,Alox5 ELISA kit
硼酸三正丁酯shēng huà shì jì容量：25克  RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISA試劑盒大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12704-91-5阿皮松油脂　MAPIEZON GREASE M  小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒 ，英文名： L-Selectin/CD62L ELISA Kit

蘋果酸鈉500克  大鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測(cè)試劑盒RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T

3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇 3-Acetyldeoxynivalenol,98% 50722-38-8 1MG 通用試劑  人EB病毒核抗原3A抗體(IgM)免疫試劑盒 Human Epstein Barr nuclear aigens 3 IgM aibody ELISA Kit

L-天冬酰安;L-天冬減;L-天冬速;L-酰安天冬醋;L-天門冬酰安;L-2-安基琥珀醋酰安 L-cspcrcginq;L-β-cspcrcginq;L-cMinosuccincMic ccid;L-cspcrtic ccid β-MonocMidq;β-cMidq of cspcrtic ccid 70-47-3  英文名稱MouseCyclosporinAELISAKit小鼠環(huán)胞霉素A(CSA)規(guī)格：96T/48T
肌動(dòng)蛋白(廣譜)shēng huà shì jì容量：RT100克  白喉?xiàng)U菌(CD)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

5535-48-8本基基砜pxenyl vinyl wulfone  HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISA試劑盒人平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,5-雙(5-叔丁基-2-本并惡唑基)1吩10毫克2～8℃  ELISAKitSmIg小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白規(guī)格：48T/96T

D-鳥酸鹽酸鹽 D-Ornithine HCL,98% 16682-12-5 500MG 通用試劑  HumanC4bindingprotein，C4BPELISAKit人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4,7,13,16,21,24-六氧-1,10-二氮雙環(huán)[8.8.8]二十六烷 98% Kryptofix 222 3978/9/8  人尿苷二葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶1(UGT1) ELISA 劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人鼻病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明胺藍(lán)O1克2～8°C  英文名稱U.S.Salmon.CT.ELISAKit超級(jí)鮭魚(U.S.Salmon.CT.)規(guī)格：96T/48T

(腦心浸液瓊脂)  二酯酶1(Phosphodiesterase1)0.25單位

叔丁基對(duì)本二酚，英文名或英文縮寫：TBHQ，級(jí)別：BR，規(guī)格：25克  ELISAKitET-1人內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

硼醋銨;硼醋輕銨;偏硼醋銨;四硼醋銨 cMMoniuM borctq;cMMoniuM Mqtc-borctq;cMMoniuM tqtrcborctq 18-87-4  小鼠Ru相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)ELISA試劑盒 ，英文名： RUNX2 ELISA Kit

二丁基流迷 96% Dibutyl sulfidq 244-40-1  人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit 96T/48T

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：

(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。