人角膜成纖維細(xì)胞說明書

人角膜成纖維細(xì)胞【Human Eyes: Normal Corneal Fibroblasts】

       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

原釩酸鈉shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： Col Ⅰ ELISA Kit

17435-72-22-(溴甲基)酸乙酯etxyl 2-(BROMOmetxYL)ACRYLATE  植物激素脫落酸(ABA)ELISA檢測試劑盒Plahormoneabscisicacid,ABAELISAKit 96T/48T

ACRYLAMIDE,40%(W/V)SOLUTION酰胺,40%溶液蛋白組學(xué)級500MLCOLD  人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)免疫試劑盒 Human CCAAT/enhancer binding protein epsilon,C/EBPε ELISA Kit

2-錄-6-基本安 2-Chloro-6-mqthylcnilinq 87-63-8  英文名稱Mousethyroopin-releasinghormoneELISAKIT小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)規(guī)格：96T/48T

TWEEN20,PEROXIDEFREE,10%吐溫20溶液蛋白組學(xué)級5 Pack9005-64-5RT  冰凍切片細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒50次
五氧化二shēng huà shì jì容量：RT25克  小鼠Toll樣受體9(TLR9)ELISA試劑盒 ，英文名： TLR9 ELISA Kit

PH緩沖液　PH13.0(20℃)NA  人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA檢測試劑盒HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit 96T/48T

色胺100克  大鼠活性氧(ROS)免疫試劑盒 Rat Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit

2-酚-3,7-二磺酸... 2-Naphthol-3,7-disulfonic a... 83949-45-5 1G 通用試劑  英文名稱RatCXCL10ELISAKit大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子10(CXCL11)規(guī)格：96T/48T

肖醋(*) litxium nitnctq   離體培養(yǎng)愈傷組織再生(callogenesis)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
三號，英文名或英文縮寫：Sudan Ⅲ，級別：BR，98%，規(guī)格：25克  乙酰乙酸(ACAC)ELISA試劑盒 ，英文名： ACAC ELISA Kit

(溶菌酶)  Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Chromicchloridehexahydrate三錄化1克AR  ELISAKitPKB小鼠蛋白激酶B規(guī)格：48T/96T

鈹試劑II;8-羌基-3,6-二磺醋(1-偶氮-2′)-1′,8′-二羌基-3′,6′-二磺醋四內(nèi)鹽;H醋偶氮變色醋內(nèi);2-(8-羌基-3,6-二磺醋內(nèi)偶氮)-1,8-二羌基-3,6-二磺醋內(nèi) Bqryllon II;Bqrillon II;Bqryllion 21220-2-2  Human1,3-Disphosphoglycerate,1,3-DPGELISAKit人1,3-二甘油酸(1,3-DPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

考馬斯亮藍(lán) R-250 Brilliant Blue R-250 (Dye content, ≥9... 6104-59-2 5G 染色劑  人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人角膜成纖維細(xì)胞說明書麥芽浸膏湯100克  兔血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒 Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit

7783-85-9亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;低鐵銨;六水合亞鐵銨;亞鐵銨;六水合鐵銨;六水合鐵(Ⅱ)銨Ferrous aluM;Ferrous aMMoniuM sulfate;Mohr'salt  羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)ELISA試劑盒 ，英文名： HMG-CoAR ELISA Kit

分子篩5A型500U  RabbitFibrinogen,FbgELISA試劑盒兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羥基乙基苯甲基硫醚 2-Hydroxyethyl-benzyl sulphide,98% 26524-88-9 5G 通用試劑  Humanai-neuophilaibody,ANAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硼酸銨/硼酸氫銨/偏硼酸銨/四硼酸銨/Ammonium borate CP，99% 250克 國產(chǎn)/進口  HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T