人角膜上皮細胞培養

人角膜上皮細胞【Human Eyes: Normal Corneal Epithelial Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

原釩酸鈉100毫克保存：-20℃  英文名稱Ratleucocyteaigen-B27ELISAKit大鼠白細胞抗原B27(HLA-B27)規格：96T/48T

Chymostatin 5mg原裝 Amresco J584  酒類乙比色法定量檢測試劑盒20次

四庚基溴化shēng huà shì jì容量：100克  ELISAKitHCG人絨毛膜促性腺激素規格：48T/96T

依來區普坦相關物質A clMotriptcn Rqlctqd CoMpound c;Mqthcnol 1018676-0-  小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

偶氮胭脂紅B(老批號) cZOCcRMINq B 2360/7/9  Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒
五肽胃泌素shēng huà shì jì容量：100克  人肝細胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(PH標準液)  小鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒 Mouse ierleukin 10,IL-10 ELISA KIT

酪胺鹽酸1公斤  纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒 ，英文名： FSP ELISA Kit

醋 Bcrbituric ccid 1967/2/7  MouseIerleukin2,IL-2ELISA試劑盒小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規格：96T/48T

AGAROSE3:1高分辨率瓊脂糖生物技術級100G9012-36-6RT  ELISAKitMMP-5兔子基質金屬蛋白酶5規格：48T/96T
三號膽鹽5克RT，避光  賴氨酸羥化酶(lysylhydroxylase)活性高效液相色譜定量檢測試劑盒20次

2-脫氧胞苷-5-三鈉鹽(+4℃)NA  ELISAKitCIAP人牛小腸堿性酶規格：48T/96T

金絲shēng huà shì jì容量：100克  小鼠W-3a蛋白(W3A)ELISA試劑盒 ，英文名： W3A ELISA Kit

2,4,4-三基-1-務烯;雙異 2,4,4-TriMqthyl-1-pqntqnq 107-39-1  大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒Ratplateletactivatingfactor,PAFELISAKIT 96T/48T

脫氫乙酸shēng huà shì jì容量：500克  人H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)免疫試劑盒 Human E-Cadherin ELISA Kit
人角膜上皮細胞培養麥康凱瓊脂培養基50克  HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒規格：96T/48T

7790-84-3鎘Cadmium sulfate octahydrate  人N端前腦素(-proBNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

微晶纖維素板1克2～8℃  兔誘導型合成酶(iNOS)免疫試劑盒 Rabbit inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA KIT

苯硫醚 Diphenyl sulfide,98% 139-66-2 25G 通用試劑  清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 ，英文名： SRB/CD36 ELISA Kit

醋洗矽藻土 DIcTOMcCqOUS qcRTH 68822-24-9  RabbitComplemefragme3a,C3aELISA試劑盒兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規格：96T/48T

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。