人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物說明書

人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物【Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】

人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物是從人原代小腸粘膜上皮細(xì)胞提取的，人小腸粘膜上皮細(xì)胞從正常人小腸粘膜上皮組織制備。正常人小腸粘膜上皮組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

轉(zhuǎn)基因植物NPTII單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（不含提取）481-Acetyl-piperidinecarboxylic acid251-乙酰基-甲酸

植物基因組DNA提取試劑盒（過柱法）（用于從植物中分離純化高質(zhì)量植物基因組）(S)-(4-Aminobenzyl)(1H)-oxazolidinone15253(s)-(4-氨基芐基),3-噁唑烷-酮

牛源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（定量）（不含提取）482-Amino-Formylchromone6142462-氨基-甲酰基色原酮

羊源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（定量）（不含提取）482-Aminodiphenylamine5345鄰氨基

鴨源性成分單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒（定量）（不含提取）48Acid Black 1648酸性黑 1
p-Nitrohydrocinnamic acid  16642-79-8  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Pitavastatin ethyl ester  167073-19-0  中文名：  分子式：C27H28FNO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Pitavastatin calcium  147526-32-7  中文名：匹伐他汀鈣  分子式：C50H46CaF2N2O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor B   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-B

Piracetam  7491-74-9  中文名：吡拉西坦  分子式：C6H10N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-C
紫檀芪（標(biāo)準(zhǔn)品）  Pterostilbene  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T

紫檀芪,紫檀  Pterostilbene  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 ，英文名： AT ELISA Kit

魚藤酮  Rotenone  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒 ，英文名： PCNA ELISA Kit

7-表紫杉醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  7-Epitaxol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T

澳洲茄胺;澳州茄胺（標(biāo)準(zhǔn)品）  Solasodine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 ，英文名： PCNA ELISA Kit

細(xì)辛脂素（標(biāo)準(zhǔn)品）  L-Asarinin/ (-)-asarinin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 ，英文名： ACA ELISA Kit

大黃酚-8-O-葡萄糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA檢測(cè)試劑盒MousePerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T

金合歡素;刺槐素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Acacetin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒 ，英文名： pANCA ELISA Kit

氯化木蘭花堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Escholine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T

蒲公英甾醇乙酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  taraxasteryl acetate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 ，英文名： EMAb ELISA Kit
人小腸粘膜上皮細(xì)胞提取物說明書Senkyunolide C  91652-78-7  中文名：洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H12O3    Humanplacealprotein，PPELISAKit人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Docosanoic acid  112-85-6  中文名：二十二烷酸  分子式：C22H44O2    兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O    Human plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

Glycerol  56-81-5  中文名：甘油  分子式：C3H8O3    HumanAmylinELISAKit 人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Riligustilide  89354-45-0  中文名：  分子式：C24H28O4    Humandeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T