大鼠腎上皮細胞提取物說明書

大鼠腎上皮細胞提取物【Rat Kidney：Normal Kidney Derivatives】

大鼠腎上皮細胞提取物是從大鼠原代腎上皮細胞提取的，大鼠原代腎上皮細胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

表

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

黃熱病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433

西尼羅病毒單重熒光PCR檢測試劑盒485-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-methylH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35434

基孔肯雅病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481-Methyl-nitroH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35432

馬爾堡病毒單重熒光PCR檢測試劑盒48Bendamustine hydrochloride35435鹽酸苯達莫司汀

裂谷熱病毒單重熒光PCR檢測試劑盒481,6-Dibromopyrene2797391,6-二溴芘
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA試劑盒人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  83558-87-6  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2 

HumanCytochrome-C,Cyt-CELISA試劑盒人細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  613-62-7  中文名：2-萘酚芐基醚  分子式：C17H14O 

HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA試劑盒人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4 

Humancysteinylleukoienes,CysLTsELISA試劑盒人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2,2-Diphenylglycine  3060-50-2  中文名：  分子式：C14H13NO2 

HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規格：96T/48T  22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O
托伐普坦   Tolvaptan  質量規格：度≥99.0%，BR,可用于細胞培養 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA檢測試劑盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T

磺胺噻唑  Sulfathiazole  質量規格：>99%,BR 大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP aibody)試劑盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit

磺胺噻唑(標準品)  Sulfathiazole  質量規格：含量測定 大鼠髓鞘相關糖蛋白(MAG)試劑盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit

環苯扎林鹽酸鹽  Cyclobenzaprine HCl  質量規格：>99%,BR 大鼠髓系細胞觸發受體-1(EM-1)ELISA檢測試劑盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T

鹽酸美托咪定  Medetomidine HCl  質量規格：≥99.0%,BR 大鼠髓系細胞觸發受體-1(EM-1)試劑盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit

京尼平甙(標準品)  Geniposide  質量規格：HPLC≥98%, 標準品 大鼠髓樣細胞觸發性受體2(EM2)試劑盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit

京尼平甙  Geniposide  質量規格：>98%,BR 大鼠羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit

甲睪酮; 甲基素  17-Methyltestosterone  質量規格：>98%,BR 大鼠羧甲基賴氨酸(CML)試劑盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit

四氫生物蝶呤游離堿  Tetrahydro-L-Biopterin free base  質量規格：>99% 大鼠胎盤生長因子(PLGF)試劑盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit

鹽酸替羅非班  Tirofiban HCl  質量規格：>99%,一水物，BR 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA檢測試劑盒Ratglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
大鼠腎上皮細胞提取物說明書人游離睪(F-TESTO)酶聯吸附測定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名：  分子式：C26H31N3O8 

人優球蛋白(EL)酶聯吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit  3,3-Dimethylacrylic acid  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2  度：98.0%

人隱花色素1(CRY1)酶聯吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit  3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S 

人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯吸附測定試劑盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit                 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名：  分子式：C10H7F3N2O 

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名：  分子式：C10H14O5