人食管上皮細胞提取物

人食管上皮細胞提取物【Human Esophageal: Normal Esophageal Epithelial Cell Derivatives】

人食管上皮細胞提取物是從人原代食管上皮細胞提取的，人原代食管上皮細胞從正常人食管上皮組織制備。正常人食管組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

轉基因植物NOS終止子單重熒光PCR檢測試劑盒48N-Acetylcaprolactam18881N-乙酰己內酰胺

玉米轉基因Bt176單重熒光PCR檢測試劑盒484-Aminoantipyrine1983/7/84-氨基安替比林

玉米轉基因Bt11單重熒光PCR檢測試劑盒 482-Amino-chlorobenzophenone71992-氨基-氯二苯甲酮

大豆特異性基因Lectin單重熒光PCR檢測試劑盒482-AcetylH-Isoindole,3(2H)-Dione197192-乙酰基H-異吲哚,3(2H)-二酮

玉米特異性基因Invertase單重熒光PCR檢測試劑盒48DL-Alanyl-DL-Mine19993DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸
PlasmidMaxiKit   10T                 Uzarigenin digitaloside  61217-80-9  中文名：  分子式：C30H46O8 

PlanNAplus   40ml  Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8 

PH值快速測試盒   PH quick test case                 Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S 

PH精密試紙   PH precision test paper                 Risperidal  106266-06-2  中文名：利培酮  分子式：C23H27FN4O2 

PH廣范試紙   PH wide range test paper  Risperidal  106266-06-2  中文名：利培酮  分子式：C23H27FN4O2  度：98.0%  關鍵詞：
紫杉醇  Paclitaxel  質量規格：>99%,BR,用于細胞培養,藥劑造模 Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

紫杉醇（標準品）  Paclitaxel  質量規格：HPLC>98%,標準品 Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAKit大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鹽酸帕洛諾司瓊  Palonosetron HCl  質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養 Ratsolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISA試劑盒大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

硫酸巴龍霉素  Paromomycin Sulfate  質量規格：≥675 U/mg,USP28 RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

硫酸巴龍霉素(標準品)  Paromomycin Sulfate  質量規格：含量測定 RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲磺酸帕珠沙星  Pazufloxacin Mesilate  質量規格：≥98%,BR Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAKit大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲磺酸帕珠沙星（標準品）  Pazufloxacin Mesilate  質量規格：HPLC>98%,標準品 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲磺酸培氟沙星  Pefloxacin mesylate dihydrate  質量規格：≥99.0% ,水合物 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAKit大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

甲磺酸培氟沙星（標準品）  Pefloxacin mesylate dihydrate  質量規格：HPLC>98%,標準品 Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISA試劑盒大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

培美曲塞二鈉  Pemetrexed Di  質量規格：>99%,BR,水合物 RatsolubleIerleukin6receptor,sIL-6RELISAKit大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒規格：96T/48T
人食管上皮細胞提取物Senkyunolide E  中文名：  分子式：C12H12O3  度：%  兔子球蛋白A(IgA)ELISAKit  

Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氫洋川芎內酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  兔子可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit  

Glyceryl hexacosanoate  中文名：  分子式：C29H58O4  度：%  兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit  

Digalactosyldiacylglycerol  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15  度：%  兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit               

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  兔子可溶性血栓調節蛋白(sTM)ELISA試劑盒

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。