大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-OHdG）elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) Rat 8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG ELISA Kit

大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)【實(shí)驗(yàn)用途】8-OHdG, 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG）,8-OHdG是DNA氧化損傷的特異產(chǎn)物，是*的內(nèi)源性及外源性因素對(duì)DNA氧化損傷的生物標(biāo)志物。8-OHdG是DNA氧化損傷的主要產(chǎn)物之一。在復(fù)制過(guò)程中，DNA鏈上8-OHdG可以與C以外的其它堿基配對(duì)形成點(diǎn)突變，其中GC→TA突變的發(fā)生已為大量研究所證實(shí)，并被認(rèn)為是氧化應(yīng)激因素致癌、致突變的主要機(jī)理之一。機(jī)體修復(fù)機(jī)制正常時(shí)，8-OHdG可以在hOGG1等酶的作用下從DNA鏈上切除并重新?lián)饺胝５镍B(niǎo)嘌呤堿基，而切下的8-OHdG則可入血經(jīng)尿液排出體外。8-OHdG在體內(nèi)穩(wěn)定存在，一旦形成不再被機(jī)體進(jìn)一步代謝，尿中8-OHdG含量與細(xì)胞內(nèi)DNA氧化損傷程度相關(guān)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
試劑配制:
1、大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1.大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。
仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

以下是大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的相關(guān)產(chǎn)品，點(diǎn)擊了解更多大鼠elisa檢測(cè)試劑盒。
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ACE ELISA Kit AP-1μ2抗體 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒
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磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 hnRNP C ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒
酰基輔酶A脫氫酶很長(zhǎng)鏈抗體 hnRNP A3 ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA試劑盒
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 hnRNP A2/B1 ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒
錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體 hnRNP A1 ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA試劑盒
有絲分裂激酶B抗體 hnRNP A0 ELISA Kit 異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA試劑盒
磷酸化Ack1抗體 hnRNP/RA33 ELISA Kit 異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒
磷酸化Ack1抗體 SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1 ELISA Kit 異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA試劑盒
磷酸化β抑制蛋白1抗體 IDES ELISA Kit 異鎖鏈素(IDES)ELISA試劑盒
磷酸化有絲分裂激酶A抗體 ICD ELISA Kit 異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒
磷酸化APS抗體 APT ELISA Kit 異常凝血酶原(APT)ELISA試劑盒
有絲分裂激酶A抗體 iso-Hyd ELISA Kit 異丙腎上腺素(iso-Hyd)ELISA試劑盒
干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體 ACAC ELISA Kit 乙酰乙酸(ACAC)ELISA試劑盒
水通道蛋白-2抗體 HPA ELISA Kit 乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒
腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 ACC ELISA Kit 乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒
ADP核糖基化因子樣11抗體 AChE ELISA Kit 乙酰膽堿酯酶(AChE)ELISA試劑盒
大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 AChRab ELISA Kit 乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 ACH ELISA Kit 乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng)：
1．大鼠 8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請(qǐng)避光保存。
7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請(qǐng)避光保存。
7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。