大鼠前列腺組織提取物培養(yǎng)

大鼠前列腺組織提取物【Prostate: Normal Rat Prostate Derivatives】

前列腺是雄性*的性腺器官，位于膀胱與原膈之間。前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠前列腺組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

6×TriColor DNA loading buffer(三染料)×1ml3,5-Cycloergosta,8(14),22-triene243521

6-芐氨基嘌呤溶液（6-BA）5×1ml3',5'-Anhydrothymidine7483',5'-脫水胸苷

Acrylamide/Bis 19:1 %PAA Solution0ml3,4-O-Isopropylidene shikimic acid18753

Acrylamide/Bis 29:1 %PAA Solution0ml/0m3,4-Dihydro,4-dihydroxynaphthalen(2H)-one128912

AEBSF ×3,4-Didehydrosapriparaquione1427637
Cerebroside B  88642-46-0  中文名：腦苷酯B  分子式：C41H77NO9    前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5    Human adenovirus IgG (ADV-IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒

Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Epirengynic acid  1310146-00-9  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanDihydrotestosterone,DHTELISA試劑盒人雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4    組織NADPH細(xì)胞色素C還原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
嗎替麥考酚酯-d4  Mycophenolate Mofetil-d4  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanPlateletFactor4ELISAKit人血小板因子4(PF4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基麥考酚酯(環(huán)氧樹(shù)脂雜質(zhì)E)  Methyl Mycophenolate (EP Impurity E)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanPPAR-γELISAKit人過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)規(guī)格：96T/48T

嗎替甲基麥考酚酯N-氧基(環(huán)氧樹(shù)脂雜質(zhì)G)  Mycophenolate Mofetil N-Oxide (EP Impurity G)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Humanpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

奈替米星  Netilmicin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanPro-ANP(1-98)ELISAKit人心肽Pro-ANP(1-98)規(guī)格：96T/48T

制霉菌素  Nystatin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanProgesteroneELISAkit人孕激素(Progesterone)規(guī)格：96T/48T

奧氮平內(nèi)酰胺雜質(zhì)  Olanzapine Lactam Impurity  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanProinsulinELISAKit人胰島素原(PI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

奧氮平硫代內(nèi)酰胺雜質(zhì)  Olanzapine Thiolactam Impurity  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanPSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)規(guī)格：96T/48T

2-羥甲基奧氮平  2-Hydroxymethyl Olanzapine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanP-SelectinELISAkit人P-Selectin規(guī)格：96T/48T

N-去甲基奧氮平  N-Demethyl Olanzapine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱humanPTHELISAKIT人甲狀旁腺激素(PTH)規(guī)格：96T/48T

N-氧基奧氮平  Olanzapine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanS100BELISAKit人S100B規(guī)格：96T/48T
大鼠前列腺組織提取物培養(yǎng)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒小量提取試劑盒   50T  Androstenedione  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2  度：98.0%

無(wú)內(nèi)質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T  Androstenone hydrazone  63015-10-1  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O  度：98.0%   

無(wú)菌甘油   100ml  Androstenedione  1963/5/8  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

胃泌素 (Gasin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4 

胃泌素   英文名稱：   Gasin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   G  Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：