漢坦病毒Ⅱ型（HTV-Ⅱ）核酸檢測(cè)試劑盒方法

組成及試劑配制:
1、漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

需要自備的器材：
1．漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法具有下列特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

以下是漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法的訂購(gòu)信息：

松弛肽(RLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

松弛肽(RLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

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松弛肽(RLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

松弛肽2(RLN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

松弛肽3(RLN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2(SDF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　  *  規(guī)格：　48T/96T
漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白SLAMF6 ProteinHuman

重組人 NFASC / Neurofascin 蛋白 (His 標(biāo)簽)NFASC ProteinHuman

重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)ARF3 ProteinHuman

重組人 EIF5A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)EIF5A2 ProteinHuman

重組人 CEBPG / CEBP gamma 蛋白 (His 標(biāo)簽)CEBPG ProteinHuman

重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白CHN1 ProteinHuman

重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)CHN1 ProteinHuman

重組人 DPYS / Dihydropyrimidinase 蛋白DPYS ProteinHuman

重組人 DPYS / Dihydropyrimidinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)DPYS ProteinHuman

重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)SHPK ProteinHuman

重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標(biāo)簽)PDHA1 ProteinHuman
反應(yīng)五要素：
漢坦病毒Ⅱ型(HTV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。