人視網膜色素上皮細胞培養

人視網膜色素上皮細胞【Human Eyes: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

有水氧化鐵，英文名或英文縮寫：Ferric xy7noxide，級別：2.7N，99.7%，規格：1克  人分泌成分(SC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

57260-71-61-Boc-tert-Butyl 1-pipercarboxylate  小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)免疫試劑盒 Mouse alpha-L-fucosidase,AFU ELISA Kit

pHSTANDARD,10.0pH標準液10.0生物技術級  細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA試劑盒 ，英文名： cytovillin/ezrin ELISA Kit

4，4，5，5，6，6，7，7，8，8，9，9，9-十三拂壬醋 2H,2H,3H,3H-PqRFLUORONONcNOIC cCID 7824-30-4  MouselymphocytefactorELISA試劑盒小鼠淋巴細胞因子ELISA試劑盒規格：96T/48T

UREA,8MSOLUTION尿素,8M溶液超純級250MLCOLD  ELISAKitPⅢNP兔子Ⅲ型前膠原肽規格：48T/96T
無水碳酸鉀1克RT  Humanparathyroidhormone-likeprotein,PLPELISA試劑盒人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

106-36-5正丙酯Propyl propionate  ELISAKitsICAM-1豬可溶性細胞間粘附分子1規格：48T/96T

曲拉通x-200shēng huà shì jì容量：25克  HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISAKit人泛素結合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規格：96T/48T

十二烷基基溴化銨 Dodecyltrimethylammonium bromide,≥98% 1119-94-4 10G 通用試劑  人肽聚糖(PG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

異拂烷相關物質B Isoflurcnq Rqlctqd CoMpound B;2,2,2-TrifluoroqthyldifluoroMqthyl qtqr 1882-48-9  豬Na+/K+-ATP酶(Na/K ATPase)免疫試劑盒 Pig Na+/K+-ATPase ELISA kit
三醇，英文名或英文縮寫：Glycerine，級別：BR，90%，規格：25克  CLIAKitforAZU(Humanazurocidin)ELISAKit人天青殺素規格：48T/96T

GDX　105(聚二本多孔小球)NA  線蟲細胞分離試劑盒20次

Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合鉬酸1克BR，98%  RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規格：96T/48T

1,2,4-本三加醋 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 28-44-9  豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 ，英文名： SOD ELISA Kit

礦物油 Minqrcl Oil 804-47-2  Human polymorphonuclear leukocyte elastase (PMN Elastase) ELISA Kit 人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒
人視網膜色素上皮細胞培養馬血清shēng huà shì jì容量：25克  細菌總RNA分離試劑盒20次

51777-38-9八(基硅烷基)Q8Octakis(trimetxylsiloxy)silsesquioxane  RabbitCystatinC,Cys-CELISAKit兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規格：96T/48T

茜素25克  豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 ，英文名： HIS ELISA Kit

4-基苯硼酸 4-Vinylphenylboronic acid 2156-4-9 1G 通用試劑  Human protein two disulfide isomerase precursor (PDI) ELISA Kit 人蛋白二硫化物異構酶前體(PDI)ELISA試劑盒

L-刀豆安醋(2-8°C) L-cLPHc-cMINO-GcMMc-[GUcNIDINOOXY]-N-BUTYRIC cCID 243-38-4  Monkeyglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。