PrimaCell™小鼠關節(jié)軟骨細胞試劑盒價格

PrimaCell™小鼠關節(jié)軟骨細胞試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

載玻片細胞INSULI-ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  11013-97-1甲基橙皮苷規(guī)格  Methyl hesperidin

humanβ-tubulin,TUBBELISA試劑盒人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  38763-29-0甲基黃連堿  Worenine

小鼠轉化生長因子α(TGFα)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFα ELISA Kit  2292-16-2甲基蓮心堿說明書  Neferine

小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA檢測試劑盒MouseGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 96T/48T  74805-92-8甲基麥冬二氫高異黃酮A品牌  Methylophiopogonanone A

人抗SS-A/Ro抗體試劑盒 Human SS-A/Ro aibody ELISA kit  74805-91-7甲基麥冬二氫高異黃酮B規(guī)格  Methylophiopogonanone B
55481-88-4大葉茜草素規(guī)格  Mollugin   豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒 Porcine ANG-2 ELISA Kit

55466-05-2酸棗仁皂苷B說明書  Jujuboside B  豬血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

55466-04-1酸棗仁皂苷A  Jujuboside A  豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒 Porcine ANG-1 ELISA Kit

553-21-9木香烴內酯規(guī)格  Costundide  豬血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測試劑盒PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T

55297-87-5法卡林二醇說明書  Bitte angeben     豬血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測試劑盒PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit 96T/48T
犬5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒Canine5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T  65604-80-0麥冬皂苷D'品牌  ophiopogonin D'

犬水通道蛋白5(AQP5)試劑盒 Dog aquaporin-5,AQP5 ELISA kit  57-87-4甾醇規(guī)格  Ergosterol

英文名稱HumanLBPELISAKit人脂多糖結合蛋白(LBP)規(guī)格：96T/48T  479-91-4蔓荊子黃素  Vitexicarpin

超氧化物歧化酶(SOD)組織裂解樣品制備試劑盒50  88105-29-7三七皂苷Fe說明書  Notoginsenoside Fe

RatHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  冬青素A品牌  Ilexgenin A
PrimaCell™小鼠關節(jié)軟骨細胞試劑盒價格298-81-7花椒說明書  8-Methoxypsoralen   英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠1脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

298-81-7花椒  8-Methoxypsoralen   英文名稱RvatPhospholipidaseA2elisakit大鼠1脂酶A2(sPLA2)規(guī)格：96T/48T

29838-67-3落新婦苷  Astilbin  英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin    英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格：96T/48T

29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin   英文名稱Ratβ-HCGELISAKit大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-HCG)規(guī)格：96T/48T