人支氣管平滑肌細胞提取物【Human Lung: Normal Bronchial Smooth Muscle Cell Derivatives】 人支氣管平滑肌細胞提取物是從人原代人支氣管平滑肌細胞提取的,人原代支氣管平滑肌細胞從正常人支氣管組織制備。正常人成骨組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 人支氣管平滑肌細胞提取物 | 英文名稱 | Human Lung: Normal Bronchial Smooth Muscle Cell Derivatives | 貨號 | EYX98995 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。 豬應(yīng)激基因PCR-RFLP檢測試劑盒/Ondansetron hydrochloride996141鹽酸昂丹司瓊 核酸提取試劑盒(磁珠法)Olopatadine hydrochloride14626鹽酸奧洛他定 Beta內(nèi)酰胺類 ELISA試劑盒96TOlmesartan medoxomil1446893奧美沙坦酯 阿莫西林 ELISA試劑盒96TOleandrin4656 氯霉素(CAP) ELISA試劑盒96TOlanzapine1325396奧氮平 Physaminimin C 中文名: 分子式:C28H38O8 大鼠補體片斷5a(C5a)ELISAKit Phyperunolide E 中文名: 分子式:C28H40O9 中文名稱 方法 規(guī)格 Phyllostine 中文名: 分子式:C7H6O4 大鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit Phomaligol A 中文名: 分子式:C14H20O6 大鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit Phenytoin 中文名:苯妥英 分子式:C15H12N2O2 大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISAKit 梓甙 HPLC≥95% 20mg Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISA試劑盒大鼠細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異紅花八角醇 HPLC≥95% 20mg Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISAKit大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 乙酰桉樹素 HPLC≥95% 20mg Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISA試劑盒大鼠細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 知母皂苷B HPLC≥98% 20mg RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 丹參素 HPLC≥98% 20mg RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA試劑盒大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 原B HPLC≥98% 20mg RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 原C HPLC≥98% 20mg RatMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISA試劑盒大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 蓮心堿高氯酸鹽 HPLC≥98% 20mg Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 脫氫芳樟醇 HPLC≥98% 20mg Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISA試劑盒大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Thunberginol C HPLC≥95% 20mg Ratmacrophageinflammatoryprotein1β,MIP-1βELISAKit大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人支氣管平滑肌細胞提取物Sennoside B 128-57-4 中文名:番瀉苷B 分子式:C42H38O20 度:95.5% 關(guān)鍵詞: 瀉藥; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白elisa試劑盒 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白試劑盒、小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Sennoside A 81-27-6 中文名:番瀉苷A 分子式:C42H38O20 度:92.0% 關(guān)鍵詞: 瀉藥; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血小板衍生生長因子elisa試劑盒 小鼠血小板衍生生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠血小板衍生生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠血小板衍生生長因子試劑盒、小鼠血小板衍生生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Senkyunolide S 172723-28-3 中文名: 分子式:C12H16O5 度:% 關(guān)鍵詞: 川芎; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠胰島素樣生長因子elisa試劑盒 小鼠胰島素樣生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠胰島素樣生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠胰島素樣生長因子試劑盒、小鼠胰島素樣生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Senkyunolide R 172549-37-0 中文名: 分子式:C12H16O5 度:% 關(guān)鍵詞: 川芎; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 Senkyunolide I 94596-28-8 中文名: 分子式:C12H16O4 度:94.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒 |