小鼠小腸平滑肌細胞提取物說明書

小鼠小腸平滑肌細胞提取物【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cell Derivatives】

小鼠小腸平滑肌細胞提取物是從小鼠小腸平滑肌細胞提取的，小鼠小腸平滑肌細胞從正常小鼠小腸組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

病毒核酸四重實時熒光PCR檢測試劑盒Tα-Spinasterol glucoside17456α-菠甾醇葡萄糖苷

甲型H1N1亞型/季節性H3亞型/Victoria系/Yamagata系人類流感病毒四重實時熒光PCR檢測試劑盒Tα-Spinasterol acetate46516α-菠甾醇乙酸酯

甲型/乙型/甲型H1N1亞型/季節性H3亞型人類流感病毒四重實時熒光PCR檢測試劑盒Tα-Lipoic acid778α-硫辛酸

ABT9+7 呼吸道病毒多重PCR快速檢測試劑盒Tα-Lapachone473

肺炎鏈球菌多重PCR血清分型檢測試劑盒Tα-D-Glucose4922α-D-葡萄糖
Mesterolone  1424-00-6  中文名：甲氫睪酮  分子式：C20H32O2    人轉移因子(TF)酶聯吸附測定試劑盒   Human TF (ansfer Factor) ELISA Kit

Testosterone undecanoate  5949-44-0  中文名：十一酸睪酮  分子式：C30H48O3    人轉運蛋白1(TNPO1)酶聯吸附測定試劑盒   Human TNPO1 (anspoin 1) ELISA Kit               

4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名：4-氯去氫甲基睪酮  分子式：C20H27ClO2    人轉鐵蛋白（F）ELISA試劑盒  

Cholesterol  57-88-5  中文名：膽固醇  分子式：C27H46O    人轉錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒  

Mefenamic acid  61-68-7  中文名：甲滅酸  分子式：C15H15NO2    人轉甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒
鹽酸克林霉素(標準品)  Clindamycin HCl  質量規格：>800μg/mg,含量測定 冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

鹽酸維拉帕米  Verapamil HCl  質量規格：>99%,USP32,BR,可用于細胞培養 冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

鹽酸維拉帕米（標準品）  Verapamil HCl  質量規格：HPLC>98%,標準品 冰凍切片組織CASPASE-5蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

霉酚酸; 麥考酚酸;MPA  Mycophenolic acid  質量規格：>98%,BR 冰凍切片組織CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

霉酚酸; 麥考酚酸（標準品）  Mycophenolic acid  質量規格：HPLC>97%,標準品 冰凍切片組織CASPASE-7蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿莫西林/羥氨芐青霉素  Amoxicillin   質量規格：BR級，可用于細胞培養，度99%以上,三水合物,USP30 冰凍切片組織CASPASE-8蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

阿莫西林（標準品）  Amoxicillin   質量規格：含量測定 冰凍切片組織CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

非諾貝特  Fenofibrate  質量規格：>99%,EP6.0 冰凍切片組織CDK2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

非諾貝特（標準品）  Fenofibrate  質量規格：HPLC>98%,標準品 冰凍切片組織CDK3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

丙磺舒  Probenecid  質量規格：>98%,BR 冰凍切片組織CDK4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20
小鼠小腸平滑肌細胞提取物說明書蠶多巴胺   英文名稱：   Bombyx Dopamine   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DPA  Methyl β-D-fructofuranoside  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6 

菜豆凝集素elisa試劑盒   菜豆凝集素試劑盒   規格型號：96T/48T   菜豆凝集素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：菜豆凝集素試劑盒、菜豆凝集素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名：4-氯去氫甲基睪酮  分子式：C20H27ClO2 

補體C4測定試劑盒（比濁法）                    Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12 

表皮生長因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%

表皮生長因子受體   英文名稱：   epidermal growth factor receptor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   EGFR  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  中文名：  分子式：C28H44O4

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。