人胰腺癌組織源細胞提取物說明書

人胰腺癌組織源細胞提取物【Human Cancer: Pancreatic Cancer Tissue Cell Derivatives】

人胰腺癌組織源細胞提取物是從人胰腺癌組織源細胞提取的，人胰腺癌組織源細胞從人胰腺癌組織制備。人胰腺癌組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

曲拉通 X00 Triton X000ml6-O-Feruloylglucose13788756-O-阿魏酰葡萄糖

四甲基 TEMEDmlArillatose B1379415

蔗糖 Sucrose0gCatalponol methylthiomethyl ether143574

十二烷基硫酸鈉 SDS0gEthyl glucoside31989乙基葡萄糖苷

異丙基-ß-D-硫代半乳糖苷 IPTG5g3-Hydroxycatalponol2656444
Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  109837-85-6  中文名：  分子式：C19H34O3  度：%  關鍵詞：    小鼠晚期糖基化終末產物elisa試劑盒   小鼠晚期糖基化終末產物試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠晚期糖基化終末產物試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠晚期糖基化終末產物試劑盒、小鼠晚期糖基化終末產物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  147118-35-2  中文名：  分子式：C31H39O4PSi  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體elisa試劑盒   小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒、小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Methoxydienone  2322-77-2  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠胰蛋白酶elisa試劑盒   小鼠胰蛋白酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠胰蛋白酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠胰蛋白酶試劑盒、小鼠胰蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Methenolone enanthate  303-42-4  中文名：美替諾龍庚酸酯  分子式：C27H42O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠支原體elisa試劑盒   小鼠支原體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠支原體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠支原體試劑盒、小鼠支原體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Methenolone acetate  434-05-9  中文名：美替諾龍醋酸酯  分子式：C22H32O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒
鹽酸羅匹尼羅  Ropinirole HCl  質量規格：>98.0% 大鼠0酸化蛋白激酶B(P-PKB)試劑盒 Rat phosphorylated protein kinase B,p-PKB ELISA Kit

鹽酸羅哌卡因  Ropivacaine hydrochloride   質量規格：>99%,BR,一水合物 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA檢測試劑盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 96T/48T

鹽酸羅哌卡因(標準品)  Ropivacaine hydrochloride   質量規格：>99%,標準品 大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit

瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣  Rosuvastatin Calcium  質量規格：>99%,BR 大鼠0酸化縫隙連接蛋白α1,43kDa(phosphorylated GJA1)試劑盒 Rat phosphorylated gap junction protein, alpha 1,43kDa(phosphorylated GJA1)ELISA kit

瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣（標準品）  Rosuvastatin Calcium  質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠0酸化核因子-κB(p-NF-κB)試劑盒 Rat phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit

西他列汀一水  Sitagliptin phosphate monohydrate  質量規格：≥98.5%,BR,可用于細胞培養 大鼠0酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)試劑盒 Rat phospho glycogen syhase kinase 3,pGSK-3 ELISA Kit

西他列汀一水（標準品）  Sitagliptin phosphate monohydrate  質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒 Rat phospho-exacellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit

壯觀霉素,鹽酸大觀霉素  Spectinomycin Hydrochloride   質量規格：>95%,BR 大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)試劑盒 Rat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA kit

壯觀霉素(標準品)  Spectinomycin Hydrochloride   質量規格：含量測定 大鼠0酸化胰島素受體(pISR1)試劑盒 Rat phosphorylated insulin receptor subsate 1,pISR1 ELISA kit

鹽酸坦洛新/鹽酸坦索羅辛  Tamsulosin hydrochloride   質量規格：>98.5%,EP6.5  大鼠0酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)試劑盒 Rat Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit
人胰腺癌組織源細胞提取物說明書λ噬菌體基因組DNA快速提取試劑盒   Fast exaction kit for phage genomic DNA  Panaxyne  122855-49-6  中文名：  分子式：C14H20O2  度：97.0%  關鍵詞：  細胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

γ-谷酰轉肽酶活性elisa試劑盒   γ-谷酰轉肽酶活性試劑盒   規格型號：96T/48T   γ-谷酰轉肽酶活性試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：γ-谷酰轉肽酶活性試劑盒、γ-谷酰轉肽酶活性elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Tryptophan  中文名：  分子式：C11H12N2O2 

γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）測定試劑盒（速率法）  Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7 

γ干擾素   英文名稱：   Rabbit γ Ierferon   規格：   48T/96T   英文縮寫：   IFN-γ  Albendazole  中文名：阿苯達唑  分子式：C12H15N3O2S 

β-整合素   英文名稱：   β-Iegrin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   β-Iegrin  Wallicoside  88797-59-5  中文名：斷節參苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  關鍵詞：

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。