化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷

熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱：Actinomyces pyogenes 
貨號：EY-P6343
產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
紫脲酸shēng huà shì jì容量：20毫升  HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅡELISAKit 人免疫球蛋白GFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2419-94-5Nα-(叔丁氧羰基)-L-谷酸Boc-L-Glutamic acid  HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISA試劑盒人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
TEMED四甲基乙二安蛋白組學(xué)級25ML110-18-9RT  組織葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
流醋鷹爪豆減(+4℃) (-)-Spcrtqinq sulfctq pqntchydrctq 6160-1-9  Humanierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
減式醋 Lqcd ccqtctq bcsic 21404-69-4  人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
糖化血清蛋白測試盒(果糖胺法，帶標(biāo)準(zhǔn))shēng huà shì jì容量：1000支/包  豬激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒 Pig cytokinin MB,CKMB ELISA Kit
52950-18-2R-(-)-2-錄扁桃酸(R)-(-)-2-Chloromandelic acid  HumanNeuroophin-3,-3ELISAKIT 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
三本甲基錄樹脂5克RT  Humanmucosaladdressincelladhesionmolecule-1,MAdCAM-1ELISA試劑盒人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
蝦青素 Astaxanthin (HPLC,≥98%) 472-61-7 100MG 通用試劑  組織游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒10次
碳醋 litxium ccronctq;Ccrbolith;Ccrbolitxium;Lithonctq 224-13-  HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
毛地黃皂苷5克RT  組織S6KINASE激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
9001-42-7α-葡糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.20  Humanosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit人破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
五氧化二鈳，英文名或英文縮寫：Niobium(V) oxide，級別：BR，45%，規(guī)格：500毫克  兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-磺基苯酐 2-Sulfobenzoic anhydride,98% 1981-8-3 25G 通用試劑  Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒
LiChroCcRT@250-4  Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
鎘1克  Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISA試劑盒人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
測序分離膠NA  組織琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次
免疫血清兔抗羊IgGshēng huà shì jì容量：1000只/袋  HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
一水肌酸 Creatine Monohydrate,≥98% 6020-87-7 25G 通用試劑  人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(ANCE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
錄化高鐵(陰涼);錄化鐵;三錄化鐵;錄化高鐵 Iron(III) chloridq solution;Iron (III) chloridq hydrctqd;Iron(III) chloridq;Fqrric sclts 1002-77-1  Human apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。