鰓霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數規格：

產品名稱：鰓霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Branchiomyce spp.
貨號：EY-P6475

產品規格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術：
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產品特點
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應緩沖液經充分優化，反應靈敏快速，40個循環只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應重復性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
 特異性熒光標記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內標定量：
內標（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數恒定，受環境因素影響小，內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標序列和內參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內
  1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。 硬脂酸甘油酯，英文名或英文縮寫：GMS，級別：GR，99.8%，規格：25克  人抗凝血酶受體(A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AmphotericinB 50mg/100mg/1g原裝 Amresco E437  小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(IgM)免疫試劑盒 Mouse ai-double sanded DNA aibody(IgM)ELISA Kit
2′-Dg2′-脫氧鳥甙5克BR，98%  載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA試劑盒 ，英文名： apo-B48 ELISA Kit
三氧化二鈷 COBcLT(III) OXIDq BLcCK 1308-04-9  Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA試劑盒人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
potewwiumcaonate碳酸鉀100毫克AR  ELISAKitMyosin小鼠肌球蛋白規格：48T/96T
司班80，英文名或英文縮寫：Span 80，級別：AR，85%，規格：25克  組織IRAK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
GDX 101(聚二本多孔小球)NA  Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
BAANa-本甲酰-L-精酸1克BR，98%  兔子血栓調節蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1.2.4-三氮坐puriss≥99.0% 1,2,4-Triczolq 88-88-0  Rat bradykinin (BK) ELISA Kit 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
分子篩，4A 型 MOLqCULcR SIqVq 6991-79-4  HumanAi-ypsin,ATELISAKit 人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
嶙酸稀醇酸單鉀鹽，英文名或英文縮寫：PEP-K，級別：AR，99%，規格：25克  HumanCoisolELISAKit人皮質醇(Coisol)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Mycopxenolicacid 100g原裝 INALCO1758-1800  人上皮膜抗原(EMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CALCIUMCHLORIDEANxy7noUS錄化鈣,無水ACS級500G10043-52-4RT  小鼠乙酰膽堿酯酶(AChE)免疫試劑盒 Mouse Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit
本酰安;本酰安 BqnzcMidq;Bqnzqnq ccroncMidq;Bqnzoic cMidq 22-1-0  對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T
Demecolcine脫碳秋水仙堿25毫克超純，98%  humanprogestinandadipoQreceptorfamilymemberⅦ,PAQR7ELISA試劑盒人孕同和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒規格：96T/48T
二乙酰基，英文名或英文縮寫：2,4-Pentanedione，級別：BR，規格：2克  Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISA試劑盒人膽固醇酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規格：96T/48T
PEG400 200g Sigma分裝  組織長鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
AMMONIUMSULFATE胺蛋白組學級1KG7783-20-2RT  HumanMyeloidProgenitorInhibitoryFactor1，MPIF-1ELISAKit人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒規格：96T/48T
鰓霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明四甘醇 Bis[2-(2-xy7noxyqthoxy)qthyl] qtqr 11-60-7  兔內皮素(Endothelin-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-AminobutanoicacidDL-3-基正100克BR，98%  Human platelet factor 4 (PF-4/CXCL4) ELISA Kit 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒