人大隱靜脈組織提取物說明書

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人大隱靜脈組織提取物【Vascular: Normal Human Saphenous Vein Derivatives】

大隱靜脈是長的靜脈，靜脈血管壁薄、內腔大，內膜折疊形成靜脈瓣。靜脈瓣一般成對排列，呈半月狀小袋，袋口朝向心，利于靜脈回流，防止血液逆流。公司科技提供來自新鮮或冷凍人大隱靜脈組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細胞培養方法；

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項；

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

Super Fluor 5551 mgMenthyl-(4-amino-oxoH-pyrimidin-yl)-[1,3]oxathiolane-carboxylic acid142

Super Fluor 555 SE5mg5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine,4-dione14498

Super Fluor 6475mgLeflunomide7562來氟米特

Super Fluor 647 SE1 mgLafutidine1182888拉呋替丁

Super Fluor 65mg3-Ethyl-methyl-pyrrolin-one7666
Epiandrosterone  中文名：表雄酮  分子式：C19H30O2  度：98.0%  小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒  

Androstanolone 17-benzoate  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3  度：98.0%  小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒  

Rosuvastain Calcium  中文名：瑞舒伐他汀鈣  分子式：C22H28FN3O6S  度：98.0%  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒  

Ambrisentan  中文名：安倍生坦  分子式：C22H22N2O4  度：98.0%  小鼠T細胞活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒           

Propacetamol hydrochloride  中文名：鹽酸丙帕他莫  分子式：C14H21ClN2O3  度：98.0%  小鼠T細胞活化連接蛋白elisa試劑盒   小鼠T細胞活化連接蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠T細胞活化連接蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠T細胞活化連接蛋白試劑盒、小鼠T細胞活化連接蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
人參皂苷Rh3(標準品)  Ginsenoside Rh3  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠肌細胞生成素(MYOG)ELISA試劑盒 ，英文名： MYOG ELISA Kit

人參皂苷Ro（標準品）  Ginsenoside Ro  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠肌營養不良蛋白(DMD)ELISA試劑盒 ，英文名： DMD ELISA Kit

肉豆蔻木脂素(標準品)  Myrislignan  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠肌營養不良蛋白關聯糖蛋白1(DAG1)ELISA試劑盒 ，英文名： DAG1 ELISA Kit

肉桂醇（標準品）  Cinnamyl alcohol  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒 ，英文名： FBN1 ELISA Kit

肉桂醛(標準品)  Cinnamaldehyde  質量規格：GC≥99%，標準品 小鼠基端前腦素(-ProBNP)ELISA試劑盒 ，英文名： -ProBNP ELISA Kit

肉桂酸(標準品)  trans-Cinnamic acid  質量規格：GC≥98%，標準品 小鼠基端前心肽(-ProANP)ELISA試劑盒 ，英文名： -ProANP ELISA Kit

瑞香素/祖師麻甲素(標準品)  Daphnetin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠基己糖苷酶Aα(HEXα)ELISA試劑盒 ，英文名： HEXα ELISA Kit

三氯蔗糖(標準品)  Sucralose  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA試劑盒 ，英文名： HEXβ ELISA Kit

三七皂甙R1（標準品）  Notoginsenoside R1  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠基質γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 ，英文名： MGP ELISA Kit

三葉豆紫檀苷(標準品)  Trifolirhizin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠基質金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人大隱靜脈組織提取物說明書兔色素上皮衍生因子elisa試劑盒   兔色素上皮衍生因子試劑盒   規格型號：96T/48T   兔色素上皮衍生因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%  關鍵詞： 

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒     5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit     5-Azacytidine  320-67-2  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  關鍵詞： 

兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4 

兔軟骨寡聚基質蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  4-Hydroxythiobenzamide  中文名：  分子式：  度：98.0%

注意事項；

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。